红细胞C3b受体花环试验
互联网
2815
实验原理
红细胞膜上C3b受体可与补体致敏的酵母菌粘附形成花环(RBC-C3bR花结)；红细胞膜上粘附的IC中C3b分子可与未致敏的酵母菌粘附形成花环(RBC-IC花环)。
实验试剂
1. 补体致敏的酵母菌试剂：将酵母菌用生理盐水洗涤3次后，配成1％悬液，置水浴内煮沸20min，充分混匀。用二层定性滤纸(或16层纱布)过滤，除去小凝块，在低倍镜下呈单个酵母菌细胞分散状态。加等量小白鼠血清，混匀后置37℃水浴致敏15min。用生理盐水洗涤一次，2500r/min离心10min。去尽上清，用生理盐水重混悬。计数后配成1×108 /ml补体(C3)致敏的酵母菌悬液。
实验材料
待测红细胞悬液：将肝素抗凝的指血或静脉血用生理盐水洗涤离心3次，2000r/min离心3～5min，计数后配成1.25×107 /ml 红细胞悬液备用。
实验步骤
1. 取两支小试管，每管加待测红细胞悬液100ｕl，第一管再加补体致敏酵母菌悬液100ｕl，第二管加未致敏的酵母菌悬液100ｕl，摇匀放37℃水浴30min；
3. 混匀后，再加0.25％戊二醛75μl并轻轻混匀；
5. 用瑞氏法染色，油镜下计数。涂片染色后RBC为红色，酵母菌为蓝色。
