红细胞的SPA-酵母菌混合花环试验
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红细胞的SPA-酵母菌混合花环试验
【基本原理】
葡萄球菌A蛋白（SPA）能与红细胞膜上粘附的IC中IgGFc段相结合，而补体致敏的酵母菌能与红细胞膜上未粘附IC的C3b受体相结合，各自形成花环。
【试剂及材料】
（1） 金黄色葡萄球菌：一般选用金黄色葡萄球菌的国际标准株CowanⅠ（ATCC 12598或NCTC8530），用不含SPA的Wood 46株作为阴性对照。目前已有冻干的SPA菌体制剂出售。
（2） 补体致敏的酵母菌试剂：制备方法同上。
【操作方法】
（1） 在试管内加入洗过3次的待测红细胞悬液50ｕl和补体致敏酵母菌悬液50ｕl，混合，放37℃水浴30min；
（2） 加50ｕlSPA菌体悬液（6.25×108 ml）混匀，37℃水浴30min；
（3） 取出水平涂片、瑞氏染色、油镜观察。
【结果分析】
涂片染色后RBC为红色，酵母菌为蓝色，SPA菌体为浅蓝色。RBC上粘附2个以上酵母菌为RBC-C3b受体花环（酵母菌花环）；粘附10个以上 SPA菌体为RBC-IC花环（SPA花环）；同时粘附10个SPA菌体和2个酵母菌以上者为混合花环；未粘附SPA菌体与酵母菌者为裸红细胞。计数200个RBC，算出各自花环率。
【意义】
该试验可同时显示4种免疫功能状态不同的红细胞，SPA菌体花环为已全部被IC或抗RBC抗体粘附的红细胞；酵母菌花环为未粘附IC或抗RBC 抗体的红细胞；混合花环为部分粘附IC或少许抗RBC抗体，并且C3b受体有空位的红细胞；裸红细胞为未粘附IC或抗体，并且C3b活性低（不能粘附补体致敏酵母菌）的红细胞。
