丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册
点赞
收藏
wx-share
分享

糖尿病动物模型原理及方法

互联网

10520

 

Stz

STZ 诱发糖尿病动物模型原理如下:

STZ 对一定种属动物的胰岛β 细胞有选择性破坏作用,能诱发许多动物产生糖尿病,一般采用大鼠和小鼠制造动物模型。国外有学者报道选用雄性大鼠制造模型的成模率明显高于雌性大鼠。1 型糖尿病与2 型糖尿病动物模型的制备与STZ 注射的剂量有关系:大剂量注射时,由于直接引起胰岛β 细胞的广泛破坏,可造成1 型糖尿病模型;而注射较少量STZ 时,由于只是破坏一部分胰岛β 细胞的功能,造成外周组织对胰岛素不敏感,同时给予高热量饲料喂养,两者结合便诱导出病理、生理改变都接近于人类2 型糖尿病的动物模型。

造膜前的喂养 :

型糖尿病模型成模比较快,通常大鼠在普通饲料适应性喂养2 周后即可开始造模

型糖尿病模型:高脂饮食诱导加小剂量STZ 。造模前喂以高脂( 高糖) 饲料,诱发出胰岛素抵抗。

高脂( 高糖) 饲料 :

高脂( 高糖) 饲料成分:其中含10 蔗糖,10 猪油,5 胆固醇

由基础鼠饲料加蔗糖、炼猪油和蛋黄按比搭配制作高脂高糖饲料:其比例为猪油18 , 蔗糖20 , 蛋黄3 , 基础饲料59

预实验的重要性 :

很重要。实验时STZ 的给药量应参照预实验的结果,尽量不要盲目按照文献上或他人的给药量来直接使用,鼠均重和空腹( 低糖状态) 抗药力、禁食时长、注射选时、以及之前饲养过程、测糖选时等都不相同,通过预实验来确定符合自己实验鼠的给药计量,才是最科学的。

常用给药剂量 :

型糖尿病模型:大鼠剂量为7065mg/Kg

型糖尿病模型:高糖高脂喂养12 个月的大鼠,STZ 剂量在2540mg/Kg

或参考文献(鼠均重不同,本剂量以200 克 均重为例)。

配置STZ

柠檬酸缓冲液的配制:

柠 檬 酸(FW:210.14) 2.1g 加入双蒸水100mL 中配成A

柠檬酸钠(FW:294.10)2.94g 加入双蒸水100mL 中配成B

链脲佐菌素配制液:用时将AB 液按一定比例混合(11.32 也有按1:1 的),PH 计测定ph, 调节ph=4.2-4.5, 即是所需配置STZ 的柠檬酸缓冲液。

注射时 用柠檬酸缓冲液以1 的浓度溶解STZ ,按空腹体重注射相应的STZ 30 分钟内注射完毕。★ STZ 容易失活, STZ 快速称取后仍要求干燥避光,推荐用干燥铝箔( 或锡箔) 纸。

能否使用其他溶液配置缓冲液

可以。但我们推荐使用柠檬酸。例如用醋酸等溶液,也可以做出,但其PH 值不好控制,而STZ 只有在PH4.2-4.5 的时候才具有最佳药力活性。

禁食和血糖的联系 :

禁食12 小时以上( 一般过夜禁食,不禁水) 。禁食的时间越长,STZ 对胰岛β 细胞的破坏力越明显,即药效越高。所以相对禁食时间延长,可以降低STZ 的用量。

腹腔注射和尾部注射的区别 :

尾部注射即静脉注射,药物利用率较高,同比腹腔注射,可以节省药量,缺点是操作起来不如腹腔注射方便。

注射前有那些操作步骤?

过夜禁食后称重,按大鼠总重量比称取STZ ,放一干燥灭菌瓶内,外用锡纸包好,将柠檬酸缓冲液及装STZ 的瓶子置冰浴,一起带到动物房,如果注射操作技术不熟练, 应两组交替注射,建议分组溶解STZ ,比如10 只或15 只鼠/ 组。

注射时,推进速度和血糖的关系

推注的速度快,更容易形成高血糖,推注的速度慢,相对的危险性较低,但也不容易成模,常规操作中多要求快速注射。当然,STZ 的剂量是决定血糖高低的主要因素。

死鼠问题的解决

鼠的个体差别和空腹( 低血糖) 抵抗力的差异而致死亡率的不同,开始死亡率高可能主要是血糖突然升高, 鼠不适应, 或发生了DKA( 即酮症酸中毒)

首先,一定要保证足够的饮水量 ( 饮水量不足容易导致死鼠);

其次,高血糖和低血糖都会造成死鼠,避免死鼠可以通过注射胰岛素或暂时补糖,两种途径: 1 、常见为血糖过高。补胰岛素法,补一些中效胰岛素。例如给诺和灵n NPH( 中性鱼精蛋白锌胰岛素), 每次2--3 个单位, 过了3-5 天,大鼠一般死亡率就低了;2 、补糖法,禁食后的鼠,注射的时候已经处于低血糖状态,造模4 小时后腹腔注射百分之20 的葡萄糖,可避免因注射时血糖过低死鼠;

再次,防止动物自相残杀。食物缺乏和供水不足的情况下,会互相撕杀、啃食同类, 所以食物和饮水要供应充足, 最好是两路供应;

最后,防止感染。糖尿病大鼠尿量多,垫料潮湿,需要勤换垫料,所以糖尿病大鼠较其他大鼠容易出现感染,特别是泌尿道感染和腹腔感染。腹腔注射、皮下注射及采血测血糖等侵入性操作前后,要注意消毒工作。如每次采血测血糖后可用四环素( 或金霉素眼药膏) 局部涂抹处理伤口预防感染。

模型不达标者,三天后补注STZ(10mg-20mg/kg 体重剂量腹腔注射) ,也很容易成模,或让血糖恢复正常后再常规剂量注射; 但要达到理想的效果,往往是恢复到正常状态下重新造模。

STZ 的保存方法 :

2-8℃ ,干燥避光保存。( 注:本品易潮解, 如需反复取量过程中,应避免接触其受水受潮,受潮后30 分钟后失效,这和注射时要求其快速注射是一个道理,即其水溶液不稳定)。

多次称取STZ 时的操作方法和注意事项:

如确实需要多次称取,要严格按照避免受潮的原则操作和存放。

操作方法:操作环境、盛装容器、分装工具都必须保证干燥。无需冰浴,分装后用封口膜密封瓶口,用铝箔纸( 或锡箔,即避光) 将瓶子包好,放入干燥罐里(干燥剂,即保持干燥状态), 并2-8℃ 冷藏,可长期保存。本品保质期为3 年半。

链脲佐菌素(StreptozotocinSTZ) 对机体组织毒性相对较小,动物存活率高,是目前国内外使用较多的制备糖尿病动物模型的药物。为广大糖尿病研究人员提供高质量、低价格的------- 链脲佐菌素产品,使您的研究没有后顾之忧。

Sigma 相关产品资料:

Sigma S0130 Streptozocin

≥75% α-anomer basis, ≥98% (HPLC), powder

Synonym:

Streptozotocin, N -(Methylnitrosocarbamoyl)-α-D-glucosamine

CAS Number:

18883-66-4

Linear Formula:

C8 H15 N3 O7

Molecular Weight:

265.22

Beilstein Registry Number:

2060675

EC Number:

242-646-8

MDL number:

MFCD00006607

PubChem Substance ID:

24899428

Description

Frequently Asked Questions

Live Chat and Frequently Asked Questions are available for this Product.

Related Keywords

Streptozotocin, N-(Methylnitrosocarbamoyl)-alpha-D-glucosamine, STRZ, STZ, U-9889, Zanosar, U 9889, Streptozocinum, Streoptozocinium, NSC-85998, NRRL 2697, NC160_041900, Estreptozocina, C07313, 2-Deoxy-2-(3-methyl-3-nitrosoureido)-D-glucopyranose, streptozocin, induced diabetes, Methylnitrosocarbamoy

Application

Streptozocin is used to induce Type 1 diabetes for medical research.

General description

Streptozotocin, a glucosamine-nitrosourea, is a DNA alkylating agent that enters cells exclusively via the GLUT2 glucose transport protein. Streptozocin, a diabetagen, is especially toxic to pancreatic islet insulin-producing β-cells. It is toxic to GLUT2 positive neuroendocrine tumor cells.

Other Notes

Mixed anomers

Biochem/physiol Actions

An N-nitroso-containing compound that acts as a nitric oxide donor in pancreatic islets; induces death of insulin-secreting cells, producing an animal model of diabetes. Potent DNA methylating agent that induces chromosomal breakage.1 Cytotoxic to neuroendocrine tumor cell lines that express the GLUT2 glucose transporter.

性质

assay

≥75% α-anomer basis

 

≥98% (HPLC)

form

powder

color

white to off-white

mp

121 °C (dec.)(lit.)

storage temp.

−20°C

安全性

Personal Protective Equipment

Eyeshields , full-face particle respirator type N100 (US) , Gloves , respirator cartridge type N100 (US) , type P1 (EN143) respirator filter , type P3 (EN 143) respirator cartridges

Hazard Codes

Xn

Risk Statements

40

Safety Statements

36/37

RIDADR

UN3077 9/PG 3

WGK Germany

3

RTECS

LZ5775000

 

关注更多…….    
抗生素 血清 平衡盐 M199
OPTI-MEM 1640 MEM DMEM/F-12
DMEM(低糖) DMEM(高糖) 基础培养基 Zeocin
细胞解离产品 生长添加剂 粘连因子 昆虫基础培养基

 

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序