各种组织特殊染色法—弹性纤维染色

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弹性纤维主要由弹性蛋白（一种黄色硬蛋白，它是黄色弹性纤维组织的主要成分，干燥时易脆，而湿润时呈弯曲并富弹性）构成。它广泛分布于全身的各个部位，尤以循环系统，呼吸系统和皮肤系统为甚。新鲜时它呈黄色，固又称为黄色纤维。弹性纤维较细，直径0.2-1.0um，有分支，不成束。但可交织成网。它富有弹性，容易拉长，但不能拉到超过它的极限，外力除去后又恢复原状。弹性纤维与胶原纤维交织在一起，在HE染色 的标本上，含量少时不易与胶原纤维区别，含量多时呈折光性强的淡粉红色。由弹性蛋白构成弹性纤维的鞘，并非完全的密封，在其周围有许多微细孔，这些微细孔可作为营养物及排除废物的场所。
弹性纤维主要来源于带有平滑肌特征的间胚叶细胞 ，少量可由脉管的内皮细胞产生，先形成前——弹性蛋白（pro-elastin），这时在电镜下可见到直径为200nm的电子密度微纤维，在成熟的弹性纤维蛋白，电密度减少或丧失，较为均匀一致。
弹性纤维与胶原纤维，网状纤维不同，它极难容于有机或无机的溶液里。
（一）弹性纤维的变形和病理变化
随着年龄的增长，特别是到了老年的时候，弹性纤维可发生生理性的变化，这时可观察到弹性纤维的纵行分裂，断成碎片，最后成为颗粒，这些变化同时也伴有化学变化，氨基酸 和钙的含量有所增加，这些变化在皮肤是最明显的。当有病变的时候，我们便可在切片观察到有的弹性纤维增生，有的被破坏，断裂、崩解，失去弹性。如主动脉瘤，就可见到瘤壁上的弹性纤维已经失去了弹性。这是由于主动脉壁的弹性纤维受到内压的不断冲击，弹性纤维过度牵拉，超过它的极期，再也恢复不了原状，因此在切片标本上（特殊染色）只能见到其痕迹或反应物。
（二）弹性纤维的染色方法
1.Weigert氏雷锁辛品红法（1898）（Weigerts resorcin-fuchsin method）试剂的配制：
Wergert氏雷锁辛品红液：
碱性品红 2g
雷锁辛 4g
蒸馏水 200ml
30%三氯化铁 25ml
取500ml的烧瓶加入蒸馏水和雷锁辛，用玻棒搅拌均匀，加热直至沸腾，持续1-2min，再加入30%的三氯化铁水溶液继续搅拌直至煮沸2-3min后，此时溶液的颜色变为紫罗蓝色，冷却后过滤。倒去滤液，将滤纸和沉淀物一起放入烤箱中一起烤干。取200ml95%酒精，将滤纸与沉淀物一起放入加热溶解，除去滤纸，冷却后过滤，用95%酒精凑足200ml，再加入4mlHCL。即可使用，保存于4℃冰箱，可长期使用。
操作方法：
⑴切片脱蜡至水，
⑵0.5%高锰酸钾水溶液氧化5min，
⑶水洗，
⑷2%草酸漂白1-2min，
⑸水洗，
⑹入95%酒精，
⑺入Weigert氏雷锁辛液，室温染1-2h，
⑻95%酒精分化至背景清晰为止，
⑼Van Giesson氏液或核固红作对比染色，
⑽脱水透明，封固。
结果：弹性纤维：深蓝或深黑色，其余成分视用何种对比染色而定。
该法特点：
①可将微细弹性纤维显示出来。
②方法可靠，颜色鲜红色，切片可保存。
③配制好的染液可使用较长时间。
注意事项：
①1908年H art应用该法，将1%HCl酒精稀释了Weigert氏原液。即原液5-20ml。酸酒精30-40ml。结果弹性纤维显示蓝色——黑色。
②1929年French改良了这种方法，用Weigert氏原液中的2g品红，改为1g结晶紫。结果弹性纤维显示深蓝——绿色。
③1929年Sheridan改良了该法，Weigert氏原液中的2g品红改用为2g结晶紫。结果弹性纤维显示为绿色。
④在溶化沉淀物时，应隔水溶化，不要直接于明火上加热熔解。
⑤配制后的染液用小磨口瓶装，以防溶液挥发，影响染色效果。
⑥该溶液虽可保存较长时间，但仍以新鲜配制为好。
⑦切片在透明时，有人提出切片不要经过苯酚二甲苯。其原因之一是对已染色的切片有影响。