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神经系统染色技术

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神经病理学 是组织病理学的一个重要组成部分,神经病理学技术是一门较特殊的病理技术。神经组织的结构和功能较为复杂的特殊,用常规方法处理,常得不到想要的东西,因此,要想获取想要的东西,必须靠特殊的处理方法,才能将其充分地显示出来。神经系统方面可显示的物质较多,如尼氏小体、髓鞘、变性髓鞘、神经纤维和神经胶质细胞等等。这些都要靠特殊的银浸染技术,才能显示出来。下面将介绍几种显示上述物质的方法。
应用:神经系统染色应用于神经系统方面的各种疾病,如创伤、中毒、感染等引起神经系统方面的疾病,应作正常髓鞘和变性髓鞘的染色,以观察髓鞘的变化及脱失情况,如脱髓鞘假瘤与弥漫的纤维星型细胞瘤 镜下有非典型性核分裂象和弥漫浸润的单核细胞,充分发育的巨噬细胞缺少细胞将会误诊为胶质瘤,应作胶质细胞和神经纤维染色。
(一)苏木素VG法染中枢神经
1、切片脱蜡至70%酒精
2、Weigert氏铁苏木素染10分钟
3、自来水稍洗
4、如有必要,用1%盐酸酒精分化
5、流水洗10-15分钟
6、VG液染30分钟
7、蒸馏水快洗
8、95%酒精分化
9、脱水、透明、封固
结果:细胞 :灰黑色
髓鞘:灰白色
胶原:红色
肌纤维:黄色
神经细胞细胞浆 黄色/琥珀色
胶质纤维 琥珀色
(二)神经细胞尼氏体染色
正常的神经细胞都含有一定数量的尼氏化,它们主要分布于神经细胞的浆中,形状有大有小,如三角形,有的为椭圆形。这些物质能被大部分的蓝色染料所染色,这些染料如焦油坚牢紫(Cresyl fast violet)亚甲蓝(methylene blue)甲苯胺蓝(toluidine blue)硫董(thionin)等钭其染为蓝色。但是,当神经细胞受伤后,胞质内的尼氏体更可发生变化,严重的可消失。
焦油坚牢紫显示尼氏体
焦油坚牢紫 1g
蒸馏水 100ml
操作方法:
1、切片脱蜡至水
2、用焦油坚牢紫水溶液浸染20-30分钟
3、水洗
4、用95%酒精分化
5、无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶
结果:神经细胞单位:紫-蓝色
细胞核:紫-蓝色
尼氏体:紫-深蓝色
注意:1、应用酒精分化切片,要迅速,防止过度分化,将切片上的颜色全部脱掉。
神经纤维染色

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