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神经系统染色技术

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神经病理学是组织病理学的一个重要组成部分,神经病理学技术是一门较特殊的病理技术。神经组织的结构和功能较为复杂的特殊,用常规方法处理,常得不到想要的东西,因此,要想获取想要的东西,必须靠特殊的处理方法,才能将其充分地显示出来。神经系统方面可显示的物质较多,如尼氏小体、髓鞘、变性髓鞘、神经纤维和神经胶质细胞等等。这些都要靠特殊的银浸染技术,才能显示出来。下面将介绍几种显示上述物质的方法。
应用:神经系统染色应用于神经系统方面的各种疾病,如创伤、中毒、感染等引起神经系统方面的疾病,应作正常髓鞘和变性髓鞘的染色,以观察髓鞘的变化及脱失情况,如脱髓鞘假瘤与弥漫的纤维星型细胞瘤镜下有非典型性核分裂象和弥漫浸润的单核细胞,充分发育的巨噬细胞缺少细胞将会误诊为胶质瘤,应作胶质细胞和神经纤维染色。
(一)苏木素VG法染中枢神经
1、切片脱蜡至70%酒精
2、Weigert氏铁苏木素染10分钟
3、自来水稍洗
4、如有必要,用1%盐酸酒精分化
5、流水洗10-15分钟
6、VG液染30分钟
7、蒸馏水快洗
8、95%酒精分化
9、脱水、透明、封固
结果:细胞:灰黑色
髓鞘:灰白色
胶原:红色
肌纤维:黄色
神经细胞细胞浆 黄色/琥珀色
胶质纤维 琥珀色
(二)神经细胞尼氏体染色
正常的神经细胞都含有一定数量的尼氏化,它们主要分布于神经细胞的浆中,形状有大有小,如三角形,有的为椭圆形。这些物质能被大部分的蓝色染料所染色,这些染料如焦油坚牢紫(Cresyl fast violet)亚甲蓝(methylene blue)甲苯胺蓝(toluidine blue)硫董(thionin)等钭其染为蓝色。但是,当神经细胞受伤后,胞质内的尼氏体更可发生变化,严重的可消失。
焦油坚牢紫显示尼氏体
焦油坚牢紫 1g
蒸馏水 100ml
操作方法:
1、切片脱蜡至水
2、用焦油坚牢紫水溶液浸染20-30分钟
3、水洗
4、用95%酒精分化
5、无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶
结果:神经细胞单位:紫-蓝色
细胞核:紫-蓝色
尼氏体:紫-深蓝色
注意:1、应用酒精分化切片,要迅速,防止过度分化,将切片上的颜色全部脱掉。
神经纤维染色

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