植物的组织培养技术

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一． 实验目的：
1. 学习固体培养基的配制；
2. 掌握胡萝卜愈伤组织的诱导方法。
二． 实验原理：
植物 组织培养理论依据是植物细胞具有全能性。
植物组织培养是指用无菌培养的方法，在人工制备的培养基上培养植物体的一个离体器官、离体的一种组织，或单个细胞，这些离体的器官组织，或单个细胞在无菌条件下不断生长，并经过转移，能够一代一代的延续生长下去，它的方法与微生动物培养技术相似，全部在人工控制下进行。
组织培养技术内容是20年来已经从组织培养（组织块培养）发展到细胞培养 、原生质体培养和细胞融合培养等等。并用之进行各种生理化及遗传操作研究。
三、实验剂试剂和设备
1．试剂一MS培养基需要量mg/L
NH4NO3 1650mg
KNO3 190mg
KH2PO4 170mg
MgSO4.2H2O 370mg
CaCl2.2H2O 440mg
FeSO4.7H2O 2.79mg
MnSO4.7H2O 8.6mg
H3BO3 6.3mg
KI 0.83mg
NaMoO4.2H2O 0.25mg
CuSO4.5H2O 0.025mg
COCl2.6H2O 0.025mg
甘氨酸 0.2mg
VB1 0.4mg
VB6 0.5mg

为了配制培养基方便，通常配制一系列的母液。大量元素可单独或混合配制成使用浓度的10倍，微量元素可混合配制成使用浓度的1000倍，维生素生长调节物质单独配制成使用浓度的1000倍，铁液也单独配成母液，常用的是EDTA 螯和铁。
2．MS培养基母液的配制
（1）大量元素母液（10倍）配1000ml
NH4NO3 16.5g
KNO3 19g
KH2PO4 1.7g
MgSO4.2H2O 3.7g
CaCl2.2H2O 4.4
CaCl2.2H2O吸湿性强，称取随时盖盖子。以上分别溶解，顺序混合，因Ca易产生沉淀所以最后加入，可加热助溶，定容至1000ml。
（2）微元素母液（1000倍）
KI 415mg
NaMoO4.2H2O 125mg
CuSo4.5H2O 12.5mg
CoCl2.6H2O 12.5mg
MnSO4.7H2O 11.15mg
ZnSO4.7H2O 4.3g
H3BO3 3.1g
最后定容至500ml