简介
水势是推动水在生物体内移动的势能。水在土壤一植物一大气连续体中总是从水势较高处向水势较低处移动。在干旱、盐渍等条件下,一些植物常在细胞内主动积累溶质,以降低其渗透势。降低水势,增加吸水能力;植物体内水势的高低反映水分供求关系,即受水分胁迫的轻重。掌握小液流法测定植物组织水势的基本方法。
原理
植物组织水势的测定的基本原理是当植物组织与外液接触时,如果植物组织的水势低于外液的渗透势(溶质势),组织吸水、重量增大而使外液浓度变大;反之,则组织失水、重量减小而外液浓度变小;若两者相等,则水分交换保持动态平衡,组织重量及外液浓度保持不变。根据组织重量或外液浓度的 变化情况即可确定与植物组织相同水势的溶液浓度,然后根据公式计算出溶液的渗透势,即为植物组织的水势。
材料与仪器
材料:植物叶片。
试剂:
①亚甲蓝溶液
②CaCl2 溶液,包括 0. 05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、 0.40 mol・L-1 共 8 种浓度(也可用蔗糖溶液)。
器材:
① 20 mL 试管 8 支;
② 青霉素小瓶 8 个并附有软木塞;
③ 橡皮头弯嘴毛细管 1 个;
④ 特制试管架 1 个;
⑤ 面积为 0.5~1 cm2 的打孔器 1 个;
⑥ 镶子 1 个;
⑦ 解剖针 1 支;
⑧ 10 mL 移液管 2 支;
⑨ 2 mL 移液管 8 支;
⑩ 0.5 mL 移液管若干。
步骤
植物组织水势的测定的基本过程可分为如下几步:
1. 取干燥洁净的试管 8 支(为甲组),分别插在试管架相应的位置,编号。试管中分别加 0.05〜0.40 mol・L-1 8 种浓度的 CaCl2 溶液各 10 mL,塞上相应的软木塞。同时在已编号的8个青霉素小瓶(为乙组)中分别加入相应浓度的 CaCl2 溶液各 2 mL。
2. 选取均匀一致的植物叶片 8~10 片,叠在一起,用打孔器打取叶圆片 8~10 片,放入青霉素小瓶各 8 片,使叶片浸入溶液,盖紧塞子,平衡 20 min 以上。其间多次摇动小瓶,以加速水分平衡。
3. 到预定时间后,在乙组每一小瓶中,放入 1 小滴亚甲蓝溶液,摇匀,溶液变蓝。
4. 用弯嘴毛细管在乙组小瓶中吸取有色溶液少许,插入装有同样浓度溶液的甲组试管中,弯嘴毛细管尖端放在溶液中部,轻轻挤出有色溶液一小滴,小心取出毛细管(勿搅动有色液滴)。观察有色小液滴的升降情况。
若液滴下降,表示溶液浓度变大,植物组织吸水,组织水势低于溶液渗透势;若液滴上升,表示甲组相应试管中溶液浓度变小,植物组织失水,组织水势高于溶液渗透势;若液滴不动,则表示植物组织既不失水也不吸水,组织水势与溶液渗透势相等,该溶液的渗透势即为植物组织水势。若前一浓度中液滴下降,后一浓度中液滴上升,则取二者浓度的平均值。
5. 分别记录不同浓度中有色液滴的升降情况(表 2-1),找出与组织水势相当的浓度,根据原理公式计算出组织的水势。分析各自的水分状况。
项目 |
试管编号 | |||||||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | |
CaCl2 浓度/(mol・L-1) | 0.05 | 0.10 | 0.15 | 0.20 | 0.25 | 0.30 | 0.35 | 0.40 |
蓝色液滴升降情况 |
注意事项
1. 所取材料在植株上的部位要一致,打取叶圆片要避开主脉和伤口。
2. 取材以及打取叶圆片的过程操作要迅速,以免失水。
3. 毛细管尖端弯成直角,以保证从中出来的液滴不受向下力的影响。
4. 也可用亚甲蓝粉末,但带有结晶水的亚甲蓝不易溶于 CaCl2 溶液,可在 100 ℃ 下烘干成无水亚甲蓝粉末使用。
来源:丁香实验