植物的组织培养技术
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一． 实验目的：
1. 学习固体培养基的配制；
2. 掌握胡萝卜愈伤组织的诱导方法。
二． 实验原理：
植物组织培养理论依据是植物细胞具有全能性。
植物组织培养是指用无菌培养的方法，在人工制备的培养基上培养植物体的一个离体器官、离体的一种组织，或单个细胞，这些离体的器官组织，或单个细胞在无菌条件下不断生长，并经过转移，能够一代一代的延续生长下去，它的方法与微生动物培养技术相似，全部在人工控制下进行。
组织培养技术内容是20年来已经从组织培养（组织块培养）发展到
细胞培养
、原生质体培养和细胞融合培养等等。并用之进行各种生理化及遗传操作研究。
三、实验剂
试剂
和设备
1．
试剂
一MS培养基需要量mg/L
NH
4
NO
3
1650mg
KNO
3
190mg
KH
2
PO
4
170mg
MgSO
4
.2H
2
O 370mg
CaCl
2
.2H
2
O 440mg
FeSO
4
.7H
2
O 2.79mg
MnSO
4
.7H
2
O 8.6mg
H
3
BO
3
6.3mg
KI 0.83mg
NaMoO
4
.2H
2
O 0.25mg
CuSO
4
.5H
2
O 0.025mg
COCl
2
.6H
2
O 0.025mg
甘氨酸 0.2mg
VB
1
0.4mg
VB
6
0.5mg
为了配制培养基方便，通常配制一系列的母液。大量元素可单独或混合配制成使用浓度的10倍，微量元素可混合配制成使用浓度的1000倍，维生素生长调节物质单独配制成使用浓度的1000倍，铁液也单独配成母液，常用的是EDTA螯和铁。
2．MS培养基母液的配制
（1）大量元素母液（10倍）配1000ml
NH
4
NO
3
16.5g
KNO
3
19g
KH
2
PO
4
1.7g
MgSO
4
.2H
2
O 3.7g
CaCl
2
.2H
2
O 4.4
CaCl
2
.2H
2
O吸湿性强，称取随时盖盖子。以上分别溶解，顺序混合，因Ca易产生沉淀所以最后加入，可加热助溶，定容至1000ml。
（2）微元素母液（1000倍）
KI 415mg
NaMoO
4
.2H
2
O 125mg
CuSo
4
.5H
2
O 12.5mg
CoCl
2
.6H
2
O 12.5mg
MnSO
4
.7H
2
O 11.15mg
ZnSO
4
.7H
2
O 4.3g
H
3
BO
3
3.1g
最后定容至500ml
