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ELISPOT培养板的选用

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酶联免疫斑点法(ELISpot)

ELISPOT 板的主要生产商如:U-CyTech, Millipore, Nunc, BD, Whatman等。目前生产的ELISPOT板包括透明,不透明(白色),PVDF膜等多种类型的板。

国外主要生产商所生产的各类型elispot 板都能良好的进行ELISPOT试验。不推荐使用PVDF膜ELISPOT板。其原因有以下方面

1、PVDF膜在使用中容易因为温度、湿度、干燥、外力等原因产生局部皱褶,变形影响试验结果。

2、PVDF膜在使用时需非常小心,以免被加样枪头刺破膜。

3、PVDF培养板底部不透光源,在检测的过程中无法随时观察细胞状态。

4、PVDF膜在实验过程中清洗困难,洗涤的不充分往往造成背景过重影响实验结果的显示。

通过多年的实验室操作经验,推荐使用荷兰U-CyTech公司的透明ELIspot 培养板。该透明ELISPOT培养板的检测结果可以很方便的在倒置显微镜(普通的细胞室所具有的设备)下观察计数、或者采用酶联斑点自动图像分析仪分析。同时承载实验的培养板坚固耐用,容易清洗,不存在被加样枪头损坏的危险,使整个实验操作更为方便轻松。U-CyTech公司ELISPOT系统采用独特的黑色酶底物系统,显色系统非常灵敏并且稳定性更强,结果的保存期在6个月以上。

U-CyTech公司提供的透明ELISPOT培养板预先进行了无菌处理。因此在包装未破损的情况下不需进行消毒处理。不过在细胞培养过程中还是应该注意无菌操作。

红色或者蓝色斑点PVDF膜板经过干燥后可保存六个月。黑色斑点透明板干燥后可保存延长至两年。建议一定要避光保存。

ELISPOT透明板及PVDF板的利弊

透明板在操作的时候比PVDF板稍微容易点,PVDF板在使用时要进行预处理板,操作时还要小心不要把那层膜捅破了!

透明板就是显示的斑点都是黑色的,不能进行几种因子的同时测定,而PVDF板就可以用斑点颜色的变化一次来测定几种细胞因子

总结:都有优缺点,个人认为,测一种细胞因子的话还是透明板比较好。

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