果蝇遗传性状系列杂交实验
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实验五 果蝇 遗传性状系列杂交实验
【系列杂交实验内容】
1.果蝇的单因子实验杂交组合 18#♀ x 2 #♂ (正交) 2#♀ x 18#♂(反交)。
2.果蝇二对因子自由组合实验的杂交组合 e♀ x 2#♂ (正交) 2#♀ x e#♂ (反交) 。
3.果蝇的伴性遗传杂交组合 18#♀ x 22#♂ (正交) 22#♀ x 18#♂ (反交) 。
每3位同学一组,互相协作,共同完成以上实验。
【试验步骤】
1.在杂交前19-20天按杂交组合数量,计划和培养好亲本。
2.收集处女蝇:一般选择在晚上9点钟把亲本(种蝇)全部活的成虫转出处死(一个都不能剩),第二天9点钟前(12小时内,最好8-10小时内)把培养瓶里羽化的成虫转出,并按♀、♂分开培养,所得的♀蝇即为处女蝇。
3.按各杂交组合需选的果蝇品系,每瓶放入3-5对,塞好瓶塞,贴好标签,置于25℃恒温培养箱中培养。
4.过6-7天,可见到F1幼虫出现,即除去亲本成虫(成虫一定要除干净)。
5.再过4-5天,观察各杂交组合F1成蝇的性状,观察时要注意所有用具都要消毒(用于培养F2),并做好记录。
6.分别把各杂交组合F1 果蝇适度麻醉,然后选3-5对移入新的培养基中继续培养(无需挑处女蝇)。
【注意事项】
1.果蝇要适度麻醉,挑蝇用毛笔,忌用镊子和其他工具,以免影响果蝇生长繁育。
2. 挑处女蝇时,每次只挑12小时内羽化成虫,超过12小时的成虫已逐渐有交配能力,必须一只不留地倒出处死,才能进行第二次挑选。
3. 刚羽化的果蝇色淡白,体软绵,难辨♀♂,务必小心区别。
4. 使用毛笔和瓷板,要用酒精棉球 消毒,同时必须凉干才能使用。
5. 每个杂交组合放果蝇2-3对,用毛笔把果蝇扫进试管,试管要平放,待蝇醒后,方能竖起,避免果蝇粘在培养基上被闷死,杂交组合配好后,放回培养箱。
6. 培养箱温度保持在25℃,不要随意更改或调整其他旋钮,以免影响整个实验。
【实验结果的观察和统计】 1.把各杂交组合的果蝇成虫分别倒出试管,并逐个组合麻醉,观察性状,做好记录。
2.样本自由度为n-1。
3.根据实际观察数计算理论值。
4.计算xxx值,结果必须与显著平准作比较。如:p>0.05 无显著差异; p≦0.05 差异显著; p≦0.01 差异极显著。
5.计算过程各数值要求比χ2表所给数值的小数点后多取1位,以方便比较。
【作业】 根据实验经过和结果写1份实验报告,要求结合遗传学有关的内容进行分析和讨论。