弹性蛋白酶活性测定实验步骤

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问：我要检测痰中弹性蛋白酶的活力，买的是sigma的底物，在410nm处比色，请问最后酶活力用什么单位来表示呢?加完底物后，立即比色，我隔5分钟就测定一次，一共测了一个小时。最后只得出了OD值，看相关书籍及各位战友以前的帖子，发现需要划出标准曲线，请各位高手指教，具体的测酶活力的具体步骤好吗?要做哪些标准曲线呢?谢谢!

答：您每5min进行一次测定，我想目的应该是对酶反应时间进行考察，从而得出弹性蛋白酶与底物完全反应所需的时间，理论上应该是以相同的量比的弹性蛋白酶(过量)与底物若干份，分别孵育不同的时间，再进行检测，得出反应时间-OD值曲线，从中预测所需反应时间。下一步再进行标准曲线的测定，目的就是进行OD值与酶活力单位的换算，这样才能进行定量分析。设计标准曲线时应注意底物空白的设置。接着进行样品的测定，得到的OD值经标准曲线换算得到酶活力单位(U)。另推荐一文献，仅作参考，血浆弹性蛋白酶的微量测定和临床应用