ELISPOT的九点技术优势

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酶联免疫斑点法（ELISpot）

图注：ELISPOT 法在检测低频率产生细胞因子的细胞时具有独一无二的敏感性。将指定数目的能产生IFN- 的T细胞与一百万个抗原 呈现细胞（Antigen Presenting Cells，APC）混合后，使用ELISPOT 法（上图）、胞质内染法（中图）和ELISA 法（下图）分别测量产生IFN- 的细胞的数目。

1、ELISPOT 分析使单细胞分泌产物可视化。这些分析异常敏感，因为它是在直接在分泌细胞的周围进行捕捉，而且是在表面被冲淡，或者被临近的细胞上的受体捕获，或降解之前。

2、最低至1：100万细胞精度的活体外频率测量。这种分辨率已经远远超过使用细胞内细胞因子的四聚物染色和ELISA 法测量的精度。这种高敏感度是非常关键的，因为抗原 特异性T 细胞在体外都是典型性的低频率。

3、高产量T 细胞分析成为可行。一个经过训练的相关实验室小组可以测试成百的样本中几十种抗原 的反应。

4、只需要少量细胞，就可以用于通其他细胞学分析方法进行比较。例如，45毫升的血液就足以用于测试600种不同抗原 /肽类物质的反应。

5、可以定义CD4和CD8细胞的免疫因子指标。这是因为只需要少数细胞，分析就可以在高产量模式下进行。ELISPOT 分析在筛选肽库，绘制免疫因子方面是一个理想的工具。

6、用于确定抗原特异性T 细胞的功能性亲和力。这最大可能受到肽类药物刺激至50%的影响。

7、可以用于研究未经药物处理过的细胞的分泌过程。如果观察到净产量减少，可以确定这种区别是来自于分泌细胞的减少，还是每个细胞分泌产量的减少。

8、淋巴细胞在ELISPOT 分析后依然存活。这使得分析之后进行增值，用于更进一步的分析、克隆或者低温储藏成为可能。

9、低温储藏后的人类淋巴细胞可以用于检测，而不会丢失其功能。治疗前和治疗后的样本可以并排进行测试，结果可以重复。