焦磷酸测序(Pyrosequencing)技术

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焦磷酸测序 (Pyrosequencing)技术是新一代DNA序列分析技术，该技术无须进行电泳，DNA片段也无须荧光标记，操作极为简便。

Pyrosequencing技术是由4种酶催化的同一反应体系中的酶级联化学发光反应（参见Pyrosequecing的原理），在每一轮测序 反应中，只加入一种dNTP，若该dNTP与模板配对，聚合酶就可以将其掺入到引物链中并释放出等摩尔数的焦磷酸基团（PPi）。

PPi可最终转化为可见光信号，并由PyrogramTM转化为一个峰值。每个峰值的高度与反应中掺入的核苷酸 数目成正比。然后加入下一种dNTP，继续DNA链的合成。

瑞典Pyrosequencing AB公司基于Pyrosequencing技术而研究开发的PSQ 96系统是一个理想的遗传分析技术平台，它既可进行DNA序列分析，又可进行基于序列分析的SNP 检测及等位基因频率测定。我公司是国内最早引进PSQ 96 MA 技术平台的公司之一，它具有以下优点：

测序

不需要制胶，不需要毛细管，也不需要荧光染料和同位素。 10分钟内可分析96个样品的SNP，可满足高通量分析的要求。 每个样品孔都可进行独立的 或SNP分析，实验设计灵活。 序列分析简单，结果准确可靠。

Pyrosequencing技术的原理

Pyrosequencing是一项全新的DNA测序技术，可以快速、准确地测定一段较短的目标片段。其基本原理如下：

第1步：1个特异性的测序引物和单链DNA模板结合，然后加入酶混合物(包括DNA Polymerase、ATP Sulfurylase、Luciferase和Apyrase)和底物混合物(包括APS和Luciferin)。