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发酵数据处理及分析

丁香实验

1642

材料、设备及试剂
一、材料
取样的5ml发酵物
二、设备
5ml管离心机
25ml磨砂口刻度试管
电磁炉
三、试剂
3,5-二硝基水杨酸溶液:6.5g 3,5-二硝基水杨酸溶于少量水中,移入1000ml容量瓶中,加入2mol/L氢氧化钠溶液325ml,再加入45g丙酮,定容到1000ml。

操作步骤
1. 细胞干重的测定
发酵过程中收集的样品,4000r/min离心10min(上清转移至干净的试管中),加入5 mL去离子水,充分重悬细菌,再次离心,然后采用40℃充分烘干约48h除去细胞中水分,称重。
2.葡萄糖的测定
取0、1、2、3、4、5、6、7g/L的葡萄糖标准溶液各1ml,分别置于25ml刻度试管中,作为标准样。
取稀释5倍的发酵液上清1ml置于25ml刻度试管中,作为待测样。
向所有样品中各加入3,5-二硝基水杨酸溶液2ml,置于沸水中煮2分钟进行生色,然后以流动水迅速冷却,用水定容到25ml,摇匀。
以空白调零,在540nm处测定吸光度,绘制标准曲线,并计算发酵液中的糖含量。
3.发酵结果分析
绘制溶氧、转速、OD600、细胞干重、葡萄糖浓度随时间变化的曲线图,分析细菌生长的各个阶段:延滞期、对数期、稳定期和衰亡期。

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