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大白鼠胃液分泌的调节

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[实验目的]
  学习测定胃液分泌的实验方法,观察胃的泌酸功能及其分泌的调节。
[实验原理]
  胃液的分泌主要受神经与体液调节。迷走神经、胃肠激素(胃泌素)、组织胺及拟胆碱药物促进胃液的分泌,阿托品阻断迷走神经的促胃液分泌的作用而抑制胃液的分泌。
[实验对象]
  大白鼠
[实验药品]
  乙醚、3%戊巴比妥钠、生理盐水、0.01 mol·L -1 NaOH、1%酚酞、0.5 mg·m1 -1 阿托品、0.01%磷酸组织胺、1 mg·ml -1 毛果芸香碱、甲氰咪胍(组胺拮抗剂)。
[ 仪器 器械]
  常用手术器械、刺激器、止血钳、直径2~3 mm长约细塑料管、纱布、碱式 滴定管 、支架、2 ml及5 m1注射器、100 ml锥形瓶、保护电极、棉线。
[实验方法与步骤]
  1.实验准备
  (1)取体重350 g以上的大白鼠两只,预先禁食18~24 h,自由饮水。实验时,腹腔注射3%戊巴比妥钠溶液(40~50 mg·(kg体重)-1)麻醉动物,背位固定于手术台上。
  (2)颈部剪毛,作长约2.0 cm的皮肤切口,分离肌肉,找出气管,行气管插管术。
  (3) 剪去上腹部的被毛,自剑突起沿腹部正中作一个长约3 cm的切口,沿腹白线剖开腹腔,在左上腹内找到膈后食管、胃和十二指肠。将胃移至腹腔外蘸有生理盐水的纱布垫上。在膈下食管的左右分离迷走神经,穿线备用。
  (4)在食管和贲门交界处,迷走神经的下方穿一根棉线,打一个活结套,在十二指肠和幽门交界处穿二根棉线,结扎十二指肠端棉线。在颈部食管剪一小口,向胃端插入一根游离端连有8号针头的塑料管,导管深入胃1cm左右(用手指在胃表面可触摸到胃内的塑料管,以判断插入的深度),用线结扎固定,此插管用来向胃内注入生理盐水;在十二指肠近幽门端剪一小口,插入塑料导管,深入胃1cm,结扎固定,用于收集胃液(图9.8-1)。
  2.实验项目
  (1)用注射器将38℃的生理盐水从食道插管注入,冲洗胃腔,直至流出液澄清无残渣为止。用蘸有温热生理盐水的纱布覆盖创面。可用白炽灯照射给动物保温。30 min后,用5 ml生理盐水冲洗胃腔,连续冲洗3次,每次2 min,洗出液收集于锥形瓶内,共收集3个样品。收集液作为正常状态下的泌酸量。以酚酞为指示剂,用0.01 mol·L -1 NaOH溶液滴定每次所收集的胃液样品,将中和胃酸所用去的NaOH 量(L× mol NaOH),换算成μmol·(L·2 min)-1数,即为胃液的分泌量。
  (2)用连续电脉冲刺激迷走神经,每次持续5 s,间隔20 s重复刺激多次。30 min后收集胃洗出液,采用滴定法测定每一个样品中的胃酸含量。
  (3)切断迷走神经,30 min后同法收集胃洗出液,应用滴定法测定每一个样品中的胃酸含量。
  (4)收集对照样品后,立即皮下注射磷酸组织胺(1 mg·(kg体重)-1),30 min后收集胃洗出液,连续收集3个样品,应用滴定法测定每一个样品中的胃酸含量。
  (5)肌肉注射甲氰咪胍(250 mg·(kg体重)-1)收集3个样品后,再皮下注射磷酸组织胺(1 mg·(kg体重)-1),连续收集3个样品,应用滴定法测定每一个样品中的胃酸含量。
  (6) 收集对照样品后,立即皮下注射五肽胃泌素(100μg·(kg体重)-1),收集胃洗出液,连续收集3个样品,应用滴定法测定每一个样品中的胃酸含量。
  (7)收集对照样品后,立即皮下注射毛果芸香碱0.5 ml,收集胃洗出液,用滴定法测定每一个样品中的胃酸含量。
  (8)另取一只大白鼠,手术同前。按实验项目(2)的方法刺激两侧迷走神经、收集胃洗出液及测定胃酸含量,并以此胃酸含量作为对照。然后给大白鼠皮下注射阿托品(1~2 mg·(kg体重)-1),5 min后,再重复实验项目(2)的方法刺激两侧迷走神经,30 min后收集胃洗出液,测定胃酸含量。
[注意事项]
  1.大白鼠不宜麻醉过深,以免对胃液分泌量影响太大。
  2.大白鼠的迷走神经很细,分离和刺激时要十分小心谨慎。
[实验结果]
  上述各项,每一小组只做1~2项,每一项样品测定完成后,需绘曲线图表示,以胃酸排出量为纵坐标,时间为横坐标剪头表示注射药物的时间,并加以说明。各组可互相交换实验结果及所绘制的曲线。然后进行全面总结。
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