实验47 大白鼠胃液分泌的调节

 

实验47 大白鼠胃液分泌的调节

 

　　【目的要求】

　　1．学习测定胃液分泌的实验方法。

　　2．观察胃的泌酸机能及迷走神经和组织胺对胃液分泌的调节作用。

　　【基本原理】

　　胃粘膜有许多腺体。胃底和胃体粘膜的腺体分泌胃蛋白酶和盐酸，一般所称的胃液，就是指这部分液体。在一般情况下，胃液的分泌受神经与体液性调节。

　　【动物与器材】

　　大白鼠、常用手术器械、刺激器、止血钳、直径2-3mm长约15cm细塑料管、纱布垫、碱式滴定管和支架、2ml及5ml注射器、100ml锥形瓶、保护电极、棉线、0.01mol/LNaOH、1%酚酞、3%戊巴比妥钠、阿托品（0.5mg/ml）、0.01%磷酸组织胺、生理盐水。

　　【方法与步骤】

　　1.取350g以上大白鼠两只，雌雄均可。预先禁食18-24h，任其自由饮水。实验时，用戊巴比妥钠溶液腹腔麻醉，剂量为30—50mg/kg体重，用棉绳缚其四肢，背位固定于手术台上。

　　2．将颈中部被毛剪去，作长约1.5cm的皮肤切口，分离肌肉，找出气管，插入塑料气管插管。

　　3．将上腹部被毛剪去，在剑突下腹部正中剪一长约3cm的切口，沿腹白线剖开腹腔，在左上腹内找到食管、胃和十二指肠。将胃移至腹腔外沾有生理盐水的纱布垫上，于贲门处分离食管表面的迷走神经，穿线备用。用另一根线穿绕贲门一周，在大白鼠口腔内插入塑料套管，套管一端达咽部，另一端在口腔外。将细塑料管通过此套管、食管、贲门而插入胃内约2cm。用手指在胃表面触到胃内的细塑料管后，即将贲门处的线结扎，以免套管滑脱。

　　4．在胃和十二指肠交界处穿两根线，两线相距约1cm。先把十二指肠远端的线结扎，然后在十二指肠近幽门端的肠壁上剪一小孔，把细塑料管向幽门方向插入胃内，深约1cm，将事先准备好的线结扎，以固定此塑料管。

　　5．胃液样品的收集和胃酸的测定用注射器将大量温热的生理盐水冲洗胃，使残留食物由胃插管流出体外，流出的盐水澄清时即表示胃被洗净。然后将胃送入腹腔，用蘸有温热生理盐水的纱布垫覆盖，避免体温下降。或用灯泡照射，以维持动物体温。30min后，每次用5ml生理盐水冲洗胃，用锥形瓶收集由幽门端流出的液体2min，连续冲洗3次，共收集3个胃液样品，以此作为正常对照。

　　以酚酞为指示剂，用0.01mol/LNaOH溶液滴定每次所收集的胃液样品，将中和胃酸所用去的NaOH量（L）×mol/LNaOH克当量，即为每次胃酸排出量，换算成μmol/L/2min来表示。

　　6．迷走神经对胃液分泌的调节作用刺激迷走神经，每次持续5s，间隔20s，30s后按上法收集样品和测定胃酸排出量。

　　7．组织胺对胃液分泌的作用切断迷走神经，待20min后，收集一次对照样品，立即从皮下注射磷酸组织胺（1mg/kg体重），再连续收集3—4个样品，测定其胃酸排出量。

　　8．阿托品对胃液分泌的作用用另一只大白鼠，找出两侧迷走神经。刺激迷走神经，收集两次胃液样品，测定其胃酸排出量。然后再从皮下注射阿托品（1mg/kg体重）5min后再重复刺激迷走神经，并收集两次胃液，测其胃酸含量，比较结果有何不同？

　　【注意事项】

　　1．为保证胃液分泌，大白鼠不宜麻醉太深。

　　2．因大白鼠的迷走神经很细，容易拉断，分离时要非常细心。