核酸(DNA和RNA)的细胞核定位观察

一、实验目的

　　1 了解和学习两类核酸显示的原理及操作程序。
　　2 了解细胞中DNA和RNA的分布。

二、反应原理

1．Feulgen反应：
　　DNA经弱酸（1mol/L HCl）水解后，嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开，并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开，在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与Schiff（无色品红亚硫酸溶液）试剂结合，形成紫红色化合物，使细胞内含有DNA的部位呈紫红色阳性反应。

紫红色的产生是因为反应产物的分子内有醌基（醌基是一个具有颜色的发色团），所以凡含有DNA的部位，就呈紫红色。而RNA用此法处理后则分解。反应式如下：
　　
　　
2．Unna染色法：
　　1899年Pappenheim 首创了甲基绿-哌洛宁（mehtyl-green-pyronim）染色法。1902年Unna对这一方法进行了改良。1940年Brachet研究证明用甲基绿—哌洛宁对DNA和RNA有选择性的染色效果。碱性的甲基绿-哌洛宁混合染料处理细胞后，由于DNA、RNA对染料具有的亲和力不同， 而使这两种染料对两类核酸具有了选择性。 DNA被甲基绿染成绿色，RNA被哌洛宁染成红色， 这样就能使细胞中两种核酸分布显示出来。