DNA显示和细胞有丝分裂相的观察实验

核酸是生物最重要的组成成分,核酸分为两大类,即脱氧河塘核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。它们在细胞内的分布及化学性质均有所不同。DNA主要分布在核的染色质或有丝分裂过程中出现的染色体内。RNA分布在细胞质和核仁内。但在染色质及染色体中也含有少量的RNA，核仁中也有少量的DNA。在线粒体，叶绿体等细胞器内除含有RNA外，也含有少量的DNA。

一、目的与要求
了解Feulgen反应的基本原理，学习其操作方法和压片法，初步掌握细胞分裂各期的主要特点。

二、原理
Feulgen反应的原理是根据DNA经弱酸（1mol/L）水解后，打开料嘌呤和脱氧核糖连接的键，在脱氧核糖的一端形成有离的醛基。这些醛基就在原位与Schiff 试剂 结合，形成含醌基（ ）的化合物，醛基是一个发色团所以具有颜色，因此凡有DNA的部位，就呈现紫红色。

三、实验内容
1． DNA的显示法-Feulgen反应
2． 压片法
3． 细胞有丝分裂相的观察

四、 实验步骤
（一） DNA的显示法-Feulgen反应
以蚕豆根尖或洋葱根尖为材料,进行Feulgen反应的具体操作程序如下:

切取根尖
↓ 长度0.3-0.5cm

Camoy固定剂
↓ 固定10-30分钟

95%酒精
↓ 10分钟

70%酒精
↓ 10分钟

蒸馏水 →(对照) 5%三氯醋酸
↓ ↓90oC 15分钟
1mol/L HCl ← 蒸馏水
↓ 室温

1mol/L HCl
↓ 60 oC 8分钟
Schiff 试剂
↓ 40 -60分钟

亚硫酸水(1,2,3)
↓ 换3次,每次5分钟

自来水
↓ 将染色后的根尖漂洗干净,悬着染色效果好的材料

蒸馏 水
↓

压片
↓

镜检