诱变物质对植物有丝分裂的影响

一 实验目的
　　1．了解微核测试的原理和毒理遗传学在实际生活与工作中的应用范围及意义
　　2．学习黑麦根尖的微核测试技术

二 实验原理
　　微核简称(MCN)，是真核 生物 细胞中的一种异常结构，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生。在细胞间期微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外、大小应在主核1／3以下。
　　微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的断片产生的，但有些实验也证明整条的染色体或多条染色体也能形成微核。这些断片或染色体在细胞分裂末期被两个子细胞核所排斥便形成了第三个核块。
　　已经证实微核率的大小是和用药的剂量或辐射累积效应呈正相关
　　目前微核测试已经广泛应用于辐射损伤、辐射防护、化学诱变剂、新药试验、染色体遗传疾病及癌症前期诊断等各方面。

三 实验材料
　　黑麦根尖（1%氯化钴处理24小时）

四 实验器具和药品
　　实验器具：显微镜、载玻片、盖玻片、吸水纸等。
　　实验药品：氯化鈷、解离液、改良苯酚 品红。

五 实验过程
　　1．种子萌发
　　2．生根
　　3． 1%氯化钴处理24小时
　　4．根尖细胞恢复培养
　　5．（预处理）固定根尖细胞
　　6．解离、染色、镜检及微核统计
　　
　　 　
　
　　

六 实验数据的统计处理和污染程度划 分
计算各测试样品（包括对照组）微核千分率（MCN‰）
　　
　　如果对照本底MCN‰为10 ‰以下，可采用如下标准进行分析以确定样品的污染程度：
　　MCN‰在10‰以下，表示基本没有污染；
　　MCN‰在10‰－18‰区间，则表示有轻度污染；
　　MCN‰在18‰－30‰区间，则表示有中度污染；
　　MCN‰在30‰以上，则表示有重度污染；

也可以采用“污染指数”判别：
　　此方法可避免因实验条件等因素带来的MCN‰本底的波动，方法如下：
　　
　　污染指数在0－1.5区间为基本没有污染；
　　污染指数在1.5－2区间为轻度污染；
　　污染指数在2－3.5区间为中度污染；
　　污染指数在3.5以上为重度污染；

七 实验报告
　　总结染色体制片时应注意的问题。
　　对黑麦有丝分裂染色体进行核型分析。
　　微核率与处理药物的浓度有何关系？
　　什么是微核？微核产生的原因和物质基础是什么？
　　用氯化鈷处理后，在分裂期的细胞会出现什么现象？
　　绘制细胞有丝分裂中期染色体图。