材料与仪器
细胞
诺考达唑
培养瓶 试管
诺考达唑
培养瓶 试管
步骤
1. 往 175 cm2 规格的培养瓶中接种细胞，培养至汇合率达 60%~80%。
2. 用力敲打培养瓶 10 次，然后吸去培养液，以去除松散贴壁的细胞，死细胞和细胞碎片。
3. 加入 10 ml 含 0.05 mg/ml 诺考达唑的预温培养基，重新放回温箱孵育 4 小时。
4. 将培养瓶中的培养液转入无菌试管中。
5. 中等用力拍击培养瓶以剥离有丝分裂细胞，用 5 ml 原来的含诺考达唑培养液涮洗瓶子两次，再转入一支新的试管中。收集到的有丝分裂的细胞能室温放置，然后处理其余的培养瓶。每只瓶子的细胞产量为 3X105~4X106 。
6. 合并所有瓶中的有丝分裂细胞，分析有丝分裂细胞的百分比。
7. 要得到 G1 期细胞，600 g，37℃ 离心 8 分钟，用不含诺考达唑的培养基于 37℃ 重悬细胞，每 175 cm2 规格培养瓶接种 1X107 细胞，培养 3~4 细胞，收获。
2. 用力敲打培养瓶 10 次，然后吸去培养液，以去除松散贴壁的细胞，死细胞和细胞碎片。
3. 加入 10 ml 含 0.05 mg/ml 诺考达唑的预温培养基，重新放回温箱孵育 4 小时。
4. 将培养瓶中的培养液转入无菌试管中。
5. 中等用力拍击培养瓶以剥离有丝分裂细胞，用 5 ml 原来的含诺考达唑培养液涮洗瓶子两次，再转入一支新的试管中。收集到的有丝分裂的细胞能室温放置，然后处理其余的培养瓶。每只瓶子的细胞产量为 3X105~4X106 。
6. 合并所有瓶中的有丝分裂细胞，分析有丝分裂细胞的百分比。
7. 要得到 G1 期细胞，600 g，37℃ 离心 8 分钟，用不含诺考达唑的培养基于 37℃ 重悬细胞，每 175 cm2 规格培养瓶接种 1X107 细胞，培养 3~4 细胞，收获。
来源：丁香实验
