生化实验基本操作技术

一：玻璃 仪器 的洗涤及干燥：
（一） 意义：去除干扰物，提高实验结果的准确性。
（二） 常用洗涤剂：
1． 洗衣粉，肥皂，洗洁精，去污粉----用于一般去污。
2． 强酸，强碱，尿素------去除蛋白质，核酸。
3． 铬酸洗液------见附2。
4． 水（自来水，蒸馏水）------用来冲洗容器。
（三） 洗涤方法：
~undefined 洗涤程序：泡→洗（→泡）→冲→漱
1． 新 仪器 的洗涤：
2%的盐酸浸泡数小时→自来水冲净→洗涤剂溶液中浸泡过夜→试管刷蘸肥皂、洗衣粉或去污粉擦洗容器内外壁→自来水冲10 遍→蒸馏水漱洗
内壁3 遍→包装、消毒→干燥备用。
2． 非定量敞口仪器的洗涤（试管、烧杯等）用后立即放入洗涤剂溶液或清水中浸泡过夜→试管刷蘸肥皂、洗衣粉或去污粉擦洗容器内外壁→自来水冲10 遍→检查是否洗净→蒸馏水漱洗内壁3 遍→包装、消毒→干燥备用。
注意：检查毛刷顶部是否裸露，洗刷时用力不可过猛，以免戳破玻璃仪器。
3．窄口仪器的洗涤（容量瓶、 试剂 瓶）
使用后立即在洗涤剂溶液或清水中浸泡过夜→洗涤剂溶液倒入容器内（约1/4）→小心转动或摇动仪器→自来水冲10 遍→检查是否洗净→蒸馏水涮洗内壁3 遍→包装、消毒→干燥备用。
4．刻度吸管的洗涤
使用后立即用大量自来水冲洗（切勿使样品干在管内，否则难以洗净）→干燥后放入铬酸洗液中浸泡过夜→取出，在特制的容器中用自来水冲洗30 分钟→蒸馏水涮洗内壁3 遍→包装、消毒→干燥备用。
（四） 判断洗净的标准：
洗净的玻璃仪器管壁光洁、清亮，无污渍；被水湿润后，管壁呈现均匀水膜，无挂水珠。
（五）干燥方法
1、 晾干：仪器倒立放在特制架子上，自然晾干。
2、 烘干：尽量倒净仪器内部的水，将其倒立放在托盘上，放入烘箱烘干。普通仪器用80-100℃，容量分析仪器用37-40℃。
3、 有机溶剂干燥：体积小的容器急需干燥时，可用此法。洗净的仪器先用少量酒精洗一次，再用少量丙酮或乙醚洗涤，吹干（不必加热）。

二：吸管和微量移液器的使用及注意事项：
（一） 刻度吸管：
1． 作用：用于准确移取一定体积的溶液。
2． 规格（ml）：0.1，0.2，0.5，1.0，2.0，5.0，10.0。
3． 注意事项：
1） 使用前：
① 观察吸管有无破损，污渍。
②观察吸管的规格：所用吸管的规格应等于或近似等于所要吸取的溶液的体积。
③观察有无“吹”字：若有，说明刻度到尖端，放液后需将尖端的溶液吹出，否则不吹。
2） 握法：拇指和中指夹拄吸管，食指游离。
3） 取液：①垂直入液 ②入液深度适中 ③洗耳球吸取 ④取液高度高于刻度2-3cm ⑤食指按紧吸管
上端⑥刻度吸管提离液面⑦观察液内无气泡⑧滤纸擦净管壁。
4） 放液至刻度：①刻度吸管垂直②右眼与刻度线平行③轻轻松开食指（转动刻度吸管），使液面缓慢降低，直至最低点与刻度线相切。
5） 放液至容器：①刻度吸管垂直②容器倾斜45℃③使溶液自然流入容器，注意吹与不吹。
6） 一根吸管只吸取一种 试剂 ，用后立即浸入水中。
（二） 微量移液器
1、 作用：
用于准确移取一定体积的溶液，尤其是较小体积
的溶液（<100ul）。
2、 规格：
固定式、可调式；单道、多道
1，2，10，20，100，200，1000（单位：ul）
3、 注意事项：
1） 使用前：
①连续按压数次，以调节空气。
②调节体积至所需的刻度。
③接上Tip 头，注意密封。
2） 握法：手掌握住器液器，拇指按压。
3） 取液：①轻压拇指至第一停点 ②垂直握持移液器，使Tip 头浸入溶液 ③预洗一次 ④缓慢松开按钮，吸取溶液⑤等一秒钟，将移液器提离液面，擦去Tip 头外液滴。
4） 放液：①Tip 头贴住容器内壁 ②平稳地把按钮压至第一停点，等1 秒钟再压至第二停点③提起移液器，Tip 头贴容器壁擦过④松开按钮。
5） 如吸取不同溶液必需更换Tip 头。

三：电动离心机的使用：
（一） 作用：分离密度不同的物质。
（二）分类：低速离心机 <4000rpm
高速离心机 6000-20000rpm
超速离心机 >20000rpm
（三） 使用：
1、 开机：
① 将待离心溶液倒入大小适中的 离心管 中（溶液量不应超过 离心管 总体积的2/3）
② 离心管连同管套一起放在粗天平上平衡（管套底部应放置橡皮垫）
③ 对称放入 离心机 插孔中（不用的管套应拿出），盖紧上盖。
④ 开关置于“关”，调速杆置于最小（逆时针旋转至转不动，接通电源，打开开关，缓慢启动。
⑤ 用调速杆沿顺时针方向缓慢调速，观察转速，达到转速后开始计时。
2、 关机：
① 用调速杆将沿逆时针方向缓慢降速，关掉开关，切断电源。
② 停转后打开上盖，轻轻取样。
③ 离心管 套倒立放置，使其干