血清清蛋白测定(溴甲酚绿法)
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一、原理
溴甲酚绿(BCG)在pH4.2的环境中,在有非离子去垢剂(Brij-35)存在时,可与清蛋白结合形成蓝绿色复合物,颜色的深浅在一不定范围内与清蛋白含量成正比。
BCG与蛋白结合的特异性较低,它不仅与Alb结合呈色,还可与其他蛋白质呈色,其中 α 1 -球蛋白,TRF、Hp最明显,但反应速度不同,Alb可立即反应(快反应),其他蛋白质反应慢(慢反应)。
二、 试剂
1. 10mmol/L BCG贮存液 BCG1.75g,溶于5ml 1 mol/L NaOH溶液中,加蒸馏水至250ml。
2. 0.5mol/L在琥珀酸缓冲贮存液(pH4.0) NaOH10g,琥珀酸56g,溶解于800ml蒸馏水中,用1mol/L NaOH溶液调pH至4.10±0.05,加蒸馏水至1L。
3. 叠氮钠贮存液 叠氮钠40g溶于1000ml蒸馏水中。
4. Brij-35溶液 Brij-35 25g,加蒸馏水80ml,置60℃左右水浴使其溶解,然后加水至100ml。
5. BCG 试剂 于IL容量瓶内加 蒸馏 水400ml,琥珀酸缓冲贮存液100ml,BCG贮存液8ml,叠氮钠贮存液2.5ml,Brij-35溶液2.5ml,加 蒸馏 水至刻度,配好的BCG试剂的pH应为4.15±0.05。
Brij-35可提高蛋白质与染料的结合力及溶解度,提高呈色稳定性,如无Brij-35可用吐温-20代替,叠氮钠有防腐作用。
三、正常参考范围: 35~5.5g/L。
四、临床意义
1.血清清蛋白
(1)增高 常见于严重脱水所致的血浆浓缩。
(2)降低 临床上较常见,与 总蛋白 降低的原因大致相同。急性降低常见于大量出血或严重烧伤;慢性降低见于肾病蛋白尿、肝功受损、肠道肿瘤与结核、慢性出血、营养不良和消耗性疾病等。清蛋白如低于20g/L,患者可出现水肿。
溴甲酚绿(BCG)在pH4.2的环境中,在有非离子去垢剂(Brij-35)存在时,可与清蛋白结合形成蓝绿色复合物,颜色的深浅在一不定范围内与清蛋白含量成正比。
BCG与蛋白结合的特异性较低,它不仅与Alb结合呈色,还可与其他蛋白质呈色,其中 α 1 -球蛋白,TRF、Hp最明显,但反应速度不同,Alb可立即反应(快反应),其他蛋白质反应慢(慢反应)。
二、 试剂
1. 10mmol/L BCG贮存液 BCG1.75g,溶于5ml 1 mol/L NaOH溶液中,加蒸馏水至250ml。
2. 0.5mol/L在琥珀酸缓冲贮存液(pH4.0) NaOH10g,琥珀酸56g,溶解于800ml蒸馏水中,用1mol/L NaOH溶液调pH至4.10±0.05,加蒸馏水至1L。
3. 叠氮钠贮存液 叠氮钠40g溶于1000ml蒸馏水中。
4. Brij-35溶液 Brij-35 25g,加蒸馏水80ml,置60℃左右水浴使其溶解,然后加水至100ml。
5. BCG 试剂 于IL容量瓶内加 蒸馏 水400ml,琥珀酸缓冲贮存液100ml,BCG贮存液8ml,叠氮钠贮存液2.5ml,Brij-35溶液2.5ml,加 蒸馏 水至刻度,配好的BCG试剂的pH应为4.15±0.05。
Brij-35可提高蛋白质与染料的结合力及溶解度,提高呈色稳定性,如无Brij-35可用吐温-20代替,叠氮钠有防腐作用。
三、正常参考范围: 35~5.5g/L。
四、临床意义
1.血清清蛋白
(1)增高 常见于严重脱水所致的血浆浓缩。
(2)降低 临床上较常见,与 总蛋白 降低的原因大致相同。急性降低常见于大量出血或严重烧伤;慢性降低见于肾病蛋白尿、肝功受损、肠道肿瘤与结核、慢性出血、营养不良和消耗性疾病等。清蛋白如低于20g/L,患者可出现水肿。