蛋白质的化学复习笔记

摘自张迺衡编著的<生物化学>（北京医科大学，第二版)

1. 用紫外吸收法测定溶液中蛋白质含量时，波长是多少？用此波长的依据是什么？

色氨酸，酪氨酸，苯丙氨酸在280nm附近有最大吸收，多数蛋白含有这tyr， trp残基。所以在紫外分光中用280nm对它们进行检测。

2. 氨基酸有哪些成色反应？哪些是肽，蛋白质共有的？各有什么用途？

氨基酸的成色反应有茚三酮反应，丹磺酰氯，FDNB成色反应。 蛋白质的成色反应有：双缩脲反应，。其中，FDNB又叫sanger试剂， 可以与氨基酸的α-NH2形成又颜色的衍生物，并可在蛋白质水溶液中保持稳定。这几种试剂币茚三酮更具有优点。AA的R基团可保留于产物中，各种AA的R基团的不同可以用来检测蛋白质中各种氨基酸(蛋白质定性，定量分析)。

此外，含有酪氨酸，色氨酸，精氨酸，组氨酸 这四种AA的肽也有相同的反应。

酪氨酸： millon反应， 酚试剂反应， 黄色蛋白反应；

色氨酸： 乙醛酸反应， ehrlich蛋白反应；

精氨酸： 坂口反应；

组氨酸： poly反应。

3. 什么是蛋白质的一级，二级，三级，四级结构？他们分别依靠什么样的键合力建立起这样的结构？

一级结构(肽键)：各种氨基酸在多肽链上按一定顺序的排列成为~

二级结构(氢键)：多肽链骨架中原子的局部空间排列，不涉及侧链的构像，有α螺旋，β折叠和β转角。

三级结构(次级键)：具有二级结构，超二级结构或域结构的一条多肽链，由于其序列上相隔较远的氨基酸残基侧链的相互作用，而进行范围广泛的盘曲与折叠，形成包括主，侧链在内的空间排列，这种在一条多肽链中所有原子在三维空间的整体排布称为~

四级结构(次级键)：许多有生物活性的蛋白质由两条或多条肽链构成，肽链与肽链之间并不是通过共价键维系，每条肽链都有自己的一级，二级，三级结构，这种蛋白质的每条肽链叫做亚基。由亚基构成的蛋白成为寡聚蛋白，寡聚蛋白中亚基的立体排布， 亚基之间的相互关系成为蛋白质的四级结构。

4. 有哪些方法可以测定蛋白质的一级结构？

化学法：

蛋白质的一级结构分析一般先作氨基酸组成分析，再作N末端和C末端鉴定；

将链间，链内的二硫键拆开；

再选择适当的酶或化学试剂将多肽部分水解，使肽段大小适合于Edman降解法的应用；每一小肽段的序列分析完成后，用肽段重叠法将完整的多肽链顺序确定；

最后，可用电泳法确定二硫键的位置。

另外，DNA序列推断蛋白质序列由快速的优点，可与化学法和一级结构分析同时使用，互相取长补短。