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双报告基因系统与BL/CL双功能分子

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双报告基因系统

在多重发光测试中,信号是同时产生,测试是独立进行。可以测试不同的发光动力学反应或不同的发射光波。可选择的是,反应也可以按顺序被促发,如商业化的Promega公司提供的Renilla和Firefly荧光素酶双报告基因试剂。双报告系统的原理如Figure 1b.双重分析的BL/CL分析采用连续的闪烁型(Flash)发光形式,如发光蛋白水母蛋白和acridinium-9-carboxamide标记。这种方法可以在一个反应管里定量两个分析物和测试两个发光反应。因为它建立在flash型的发光上,分析测试需要非常短的时间,所以适用于高通量的筛选。

BL/CL 双功能分子

目前已有报道,一个双功能的分子既可以作为萤火虫荧光素酶的底物,又可以作为HRP的底物。通过这种方法,因为不同的发光光谱,就可在同一个反应孔中可以用两个酶标记并独立测试。通过编码BL酶的基因或发光蛋白基因与第二个基因 (编码结合蛋白,如蛋白A,蛋白G,链霉亲和素,或生物素受体肽)形成融合蛋白可以广泛用于免疫分析或免疫印迹。

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