制备多克隆抗体免疫动物的选择
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制备多克隆抗体免疫动物的选择
由于抗原分子具有多种抗原决定簇,每一种决定簇可激活具有相应抗原受体的B细胞产生免疫应答,因而可产生多种针对不同抗原决定簇的抗体,这些由不同B细胞克隆产生的抗体称之为多克隆抗体。多克隆抗体的亲和力较一般单克隆抗体高,是其独特的优点。多克隆抗体的制备是一复杂的过程,为了制备高效价和高特异性的抗体,必须有理想的免疫原,挑选合适的动物和制定切实可行的免疫方案。
能作为免疫动物用的主要是哺乳类和禽类,其中常用的有家兔、绵羊、豚鼠和鸡,有时根据需要也可选用鼠、山羊和马等。选择动物时应考虑抗原与动物的种属关系、抗原性质与动物种类、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及动物个体的选择等因素。如甾体激素多用家兔;对于难以获得的抗原,且抗体需要量少,可用纯系小鼠制备。免疫用动物应选适龄、健壮,最好为雄性。体重为25g左右Balb/c小鼠。