荧光显徽镜的分类
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1881
荧光显徽镜的分类
1903年Wood首次设计了一种能吸收可见光和允许紫外光通过的滤片。以此为基础,1911年Reichert设计了第一台荧光显微镜。随着荧光染色方法和荧光显微镜装置的改进,尤其是荧光抗体技术的建立,荧光显微镜在生物医学各领域的应用愈来愈广泛。荧光显微镜是利用一定波长的光(通常是紫外光或蓝紫光)激发显微镜下标本内的荧光物质,使之发出荧光,呈现荧光影像。荧光显微镜包括光源、滤片系统和显微镜三个部分。
荧光显微镜按高压光源的激发光路不同分为落射(反射)荧光显微镜和透射荧光显微镜。新型的落射光装置是来自于光源的光照射到干涉分光滤镜后,波长短的紫外光和紫蓝光由于滤镜上镀膜的性质而反射,当滤镜对光源呈45o
倾斜时,光便垂直射向物镜,经物镜射向标本,使标本中的荧光物质受到激发,这时物镜直接起聚光器作用。同时,波长长的部分光(绿、黄、红等)对滤镜是可透的,不向物镜方向反射,因此,滤镜起激发滤板的作用。由于标本的荧光处在可见光波长区,可透过滤镜到达目镜而被观察到。透射前者荧光图像的亮度随着放大倍数增大而提高,在高放大倍数时比透射光源强。近年研制的新型荧光显微镜多采用落射光装置,称之为落射荧光显微镜。
落射荧光显微镜和透射荧光显徽镜激发光路比较图
a.落射荧光显微镜 b.透射荧光显微镜
按结构形式分为正置式荧光显微镜和倒置式荧光显微镜。正置荧光显微镜可满足样品制成薄片后的观察方式,既可作为普通显微镜使用,也可作荧光观察。倒置荧光显微镜和正置荧光显微镜的区别在于物镜与照明系统颠倒,前者物镜在载物台之下,后者物镜在载物台之上。倒置荧光显微镜能观察各种活细胞
,通常用于培养细胞的观察。