家兔膈淋巴管铸型扫描电镜观察

有关膈淋巴系统的分布和结构，目前仅有少量的文献报道，而且多数的实验结果为来自鼠类，迄今为止，对家兔膈淋巴系统的系统研究尚未见有报道。搞清膈淋巴系统的分布和结构可为研究腹膜腔内物质的转运机制提供形态学资料。我们采用自行研制合成的一种水溶性淋巴管铸型剂（合成树脂三元共聚体的乳状溶液，共聚体含量占50%），用扫描电镜淋巴管铸型技术对家兔膈淋巴管的三维结构进行了研究。

材料和方法

一、标本 家兔58只，平均体重3.2公斤，45只作膈淋巴管铸型，扫描电镜观察。9只作光镜检查，4只作透明标本。

二、铸型剂 该铸型剂是一种合成树脂三元共聚体的乳状溶液，共聚体含量为50%，共聚体的粒子直径为0.18～0.8μm，粘滞度1.5厘沱（Centi-Stoke）。

三、方法 动物腹腔内注射3%巴比妥钠（1.5ml/kg），麻醉后，剃毛、消毒，暴露膈。

用2ml注射器、4号针头，取膈胸膜面，作膈淋巴管间接注射。注射压力以见到膈胸膜下淋巴管轻度膨胀为适。注射完毕后，将标本置入40℃温水中浸12h，使共聚体充分聚合。再置入20%NaOH腐蚀液中（60℃）1周，每天更换腐蚀液。用蒸馏水细心冲洗掉腐蚀了的组织，得到完整的膈淋巴管铸型标本。

四、扫描电镜制样 将以上得到的标本在空气中干燥，以银粉导电胶固定于标本台，离子镀膜机（Sputter Jc-100）镀金，JSM T20（JEOL）扫描电镜观察，加速电压20kV。

五、光镜观察制样 为了解膈淋巴管与周围组织的相互关系，将9只膈注射明胶墨汁。注射部位于方法同上。注射后，取下膈，用10%福尔马林固定一周。常规洒精系列脱水，石蜡包埋，作5μm厚切片，HE染色，光镜下观察。

六、透明标本制作 明胶墨汁注射的膈，脱水后，冬青油透明，光镜下观察，与扫描电镜照片相对照。

结果

1．大体观察

在膈的肌性部（相当于钟面7点处）进针，一次注射，膈肌性部的右侧及中心腱右叶的淋巴管均被充盈，有的淋巴管呈串珠状，进而进入胸骨旁淋巴结和后纵膈淋巴结。在铸型形成过程中，最先出现膈肌性部淋巴管，然后铸型剂由肌性部淋巴管扩展到膈中心腱，进而出现膈中心腱淋巴管。

2．光镜和透明标本观察

膈中心腱淋巴管铸型贴在玻片上，于光镜下观察，中心腱淋巴管呈串珠状，瓣膜切迹可见，属集合淋巴管，相互交织成网。集合淋巴管沿途收纳少数呈盲端的淋巴管。

膈肌性部的石蜡切片，在光镜下见到有墨汁填充的淋巴管。这些淋巴管与伸入肌纤维间的“小管”相通。“小管”的内皮未能看清。

3．扫描电镜观察

膈中心腱淋巴管铸型在扫描电镜下观察到的淋巴管瓣膜切迹与光镜所见相同。

膈肌性部的淋巴管呈经纬方向排列，由有瓣膜切迹的淋巴管收集。前者的淋巴管较后者密集。

在众多的淋巴管中，可见到多个呈扁平状膨大的淋巴陷窝，即毛细淋巴管盲端。在淋巴陷窝周围，有数支与之相连的毛细淋巴管，后者或单独与邻近毛细淋巴管相连成网；或交互沟通呈网状。

在与肌纤维相平行的淋巴管之间，见到许多组织管（Tissue Channels），注入与之相垂直的淋巴管。

讨论

在临床上，腹水的形成和转归、长期接触石棉纤维后间皮肿瘤的发生等，都与膈淋巴管的淋巴转归有关。因此，了解膈淋巴系统的分布和结构很有必要。本研究应用自行研制合成的铸型剂，一次间接注射即成功制成淋巴管铸型，且制成的淋巴管铸型有弹性，不易断裂，能耐受电子束的轰击，是一种较为理想的淋巴管铸型剂。

本实验在膈的肌性部进针，膈肌性部的右侧及中心腱右叶的淋巴管也能同时充盈，并看到有些淋巴管被膜下淋巴管呈串珠状，进而进入胸骨旁淋巴结和后纵膈淋巴结。并且在光镜观察中见到许多瓣膜切迹。瓣膜是哺乳动物淋巴管的特征。我们又将淋巴管铸型与膈的血管铸型相比较，血管与淋巴管的两种铸型完全不同。

对家兔膈淋巴铸型的扫描电镜观察，尚未见有报道。膈淋巴管的最主要特征是在与肌纤维相平行的淋巴管之间，看到许多组织管（Tissue Channels），注入与之相垂直的淋巴管。组织管即前淋巴管，乃是组织中没有内皮细胞衬套、低压力并与毛细淋巴管直接相通的组织间隙管道，引导组织液及蛋白质进入淋巴管内。Montgomery将前淋巴管分为血管周围前淋巴管及基质前淋巴管。我们在膈肌性部所发现的组织管属基质前淋巴管。