CHO细胞表达系统存在的问题及前景展望

存在的问题

在过去的几十年里，人类对动物细胞的培养技术进行了大量的研究开发，取得了很大进展，但是利用CHO细胞表达外源基因的技术水平尚不能满足生物药品的开发和生产的要求，目前上游工作中主要存在以下问题：

①构建的重组CHO细胞生产效率低，产物浓度亦低；

②某些糖基化表达产物不稳定，不易纯化；

③重组CHO细胞上游构建与下游分离纯化脱节，主要表现在上游构建时着重考虑它的高效表达，而对高教表达的产物是否能有效地提取出来，即分离纯化过程考虑较少；

④重组细胞培养费用昂贵，自动化水平低下。

前景展望

在今后的若干年内，随着以CHO细胞为主的动物细胞表达系统日趋完善，动物细胞将可能成为生产基因工程药物的主要宿主细胞。围绕CHO细胞表达系统而进行的相关研究将成为生物工程领域一个活跃的研究热点。科研人员将把以下问题作为今后的主攻方向：

①提高表达水平，如发展一些新的强启动子，寻找合适的增强子，装配适合于cDNA高效表达的必要元件以及根据CHO细胞翻译特点调整外源基因密码子等；

②在进一步提高表达水平的同时．还将注重分离纯化的问题，如改变DNA中的个别序列，使表达产物在不影响生物 活性的前提下，携带有利于分离纯化的基团；

③细胞培养的低成本、高密度、高产量和培养设备的大型化、自动化精巧化；

④分离纯化的低成本和高活性回收率。