ELISPOT的优势

互联网2013-12-26

1435

ELISPOT的优势

ELISPOT斑点酶联免疫分析使细胞 因子分泌过程更加形象。因为细胞 因子围绕在细胞 周围，在被上清液稀释之前，会和邻近细胞 表面的受体结合，或者降解。细胞 因子和GranzemyB ELISPOT实验是最有效的体外监控CD4或CD8T细胞 抗原的方法。通过测定单个细胞 因子信号及其频率，可以建立具有不同集落大小的特殊T细胞 库。

ELISPOT实验检测细胞 因子的独特优势 　☆从1到10，000，000，可以精确测量体外细胞 因子的分泌频率，和ELISA 以及四聚体染色、细胞 内细胞 因子染色相比，具有灵敏度高、特异性好的特点。提高灵敏度非常关键，因为体内产生抗原特异性T细胞 的频率非常低。

☆大批量细胞 分析：可以分析上百个样品，检测多种抗原。

☆所需细胞 浓度低。和其他试验方法相比，ELISPOT方法对细胞 浓度没有太高的要求，比如，检测600中不同的抗原或肽段只需要45ml血。

☆可以确定CD4或者CD8抗原决定簇。因为实验所需细胞 量少，实验灵敏，所有ELISPOT对于决定簇图谱的绘制，肽段文库的筛选是最理想的选择。 ☆可以建立抗原特异性T细胞 亲和函数

☆可以研究未经药物处理过的T细胞 的实际细胞 因子分泌过程，T细胞 分泌物下降，则说明T细胞 产量减低或者单个细胞 分泌功能下降。

☆ELISPOT不破坏淋巴细胞 活性，可以继续进行细胞 克隆以及低温储藏研究 ☆低温存藏的人淋巴细胞 可以继续保持生物学活性，可以重复实验步骤。

ELISPOT是现今研究T细胞 功能，进行T细胞 诊断最有力的工具，ELISPOT的研究已经成为一门科学。

ELISPOT分析仪专利草案 在病理学教授Paul V. Lehmann博士带领下，众多学者共同在CWRU大学通过了新一代ELISPOT分析仪的专利认证。最初ELISPOT是为了检测B细胞 分泌抗体而问世的，因为T细胞 分泌细胞 因子而B细胞 产生抗体，新一代的ELISPOT增加了检测T细胞 分泌细胞 因子的功能。 ELISPOT分析具有精确性、客观性，可重复性以及自动化特点，改变了以往ELISA 的耗时，结果不客观的缺点。 ELISPOT分析仪的出现解决了以下问题 ☆哪些斑点是抗原特异性T细胞 产生的（此斑点具有进一步分析价值），哪些是无关细胞 产生的（此斑点没有T细胞 研究价值） ☆斑点大小的意义 ☆在对不同细胞 因子计数和分析时，如何定义斑点最大和最小尺寸

☆如何从单个细胞 基础上分析

☆实验精确度有多高？如果一个细胞 产生相似的细胞 因子，在多大程度上会干扰分析结果？

☆几次重复实验才能使结果更有意义？

ELISPOT：世界一流科学家辛勤劳动的果实

ELISPOT分析仪的最初研究在CWEU大学开始，由26名工作人员，15个科研工作者，和许多来自BD、Pharmingen的科学工作者共同努力下研制成功的，为此CTL也成为美国国立卫生院免疫耐受网络（ITN）指定的参考实验室，专门对各种ELISPOT临床试验结果进行测试。

经科学认证的ELISPOT分析仪包括三个分析模式，适用于客户不同的消费水平、研究目的、外围设备，附属软件和数据处理方法。另外，CTL提供图像分析服务，ELISPOT有自己的网上实验室，可以提供网络培训以及为临床试验项目按照合同约定提供研究服务。

EILISPOT：科学革命

自从CTL发起ELISPOT革命以来，很多人在借鉴我们的成功经验。作为创始人，CTL致力于开创ELISPOT新方法并将其提高到科学的高度

<center> </center>
上一篇：siRNA实验成功要点下一篇：流式细胞术检测血小板功能及其临床应用