斐林试剂、双缩脲试剂和班氏试剂

 

斐林试剂、双缩脲试剂和班氏试剂

   斐林试剂和双缩脲试剂的成分相同，但二者的使用方法及原理不尽相同。斐林试剂和班氏试剂都是检验还原性糖的试剂，二者的使用方法及原理、成分也有区别，下面就从这几种试剂的使用原理、成分及使用方法等方面做一简单比较。

1. 斐林试剂和双缩脲试剂

斐林试剂和双缩脲试剂都由 溶液和 溶液组成，但二者有如下三点不同：

（ 1 ）溶液浓度不同

斐林试剂中 溶液称为斐林试剂甲，其浓度为 溶液称为斐林试剂乙，其浓度为 ；双缩脲试剂中 溶液（双缩脲试剂 A ）的浓度为 ， 溶液（双缩脲试剂 B ）的浓度为 。

（ 2 ）使用原理不同

斐林试剂是新配制的 溶液，它在加热条件下与醛基反应，被还原成砖红色的 沉淀，可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时，溶液的颜色变化过程为：浅蓝色→棕色→砖红色（沉淀）。

鉴定生物组织中是否含有蛋白质时，常用双缩脲法，使用的是双缩脲试剂，发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下的 与双缩脲试剂发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲（ ）结构相似的肽键，所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应，可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。

（ 3 ）使用方法不同

斐林试剂使用时，先反 溶液和 溶液混合（将 滴 溶液滴入 溶液中），而后立即使用：双缩脲试剂使用时，先加入 溶液（ 2mL ），振荡摇匀，造成碱性的反应环境，然后再加入 3~4 滴 溶液，振荡摇匀后观察现象。

 

2. 斐林试剂和班氏试剂

 

关于斐林试剂和班氏试剂，可用下面的例题引出其异同点：例：你可用什么方法，检验人的尿液中是否含有糖？

 

答案：

 

方法一：在试管中加入人的尿液 0.1mL ，加入班氏糖定性试剂 1mL ，混合均匀后，将试管放入盛有开水的烧杯中，加热煮沸 1min~2min ，若试管中溶液在加热后产生了砖红色沉淀，说明尿液中含有糖。

 

方法二：取少许尿液加水稀释后，加入刚配制好的斐林试剂，沸水浴加热后，若出现砖红色沉淀，则说明尿液中含有糖。

 

方法三：取少许尿液加水稀释后，加入少许 悬浊液（新制）加热，若出现砖红色沉淀，则说明尿液中含有糖。

 

因斐林试剂实质上是新配制的 溶液，所以方法二与方法三的实质是相同的，只是说法不同而已。

 

由以上例题可以看出，斐林试剂和班氏试剂都能用于鉴定可溶性还原糖（上题中检验的是葡萄糖）的存在，二者有相同点，也有不同点。

 

二者的不同点，可以归纳为以下几点：

 

（ 1 ）班氏试剂常用于尿糖的鉴定，其配方与斐林试剂不一样，其配方为：

 

① 400mL 水中加 85g 柠檬钠和 50g 无水碳酸钠；

 

② 50mL 加热的水中加入 8.5g 无水硫酸铜。制成 溶液；

 

③把 溶液倒入柠檬酸钠 溶液中，边加边搅，如产生沉淀可滤去。

 

（ 2 ）其反应原理与斐林试剂略有差别。利用斐林试剂鉴定时，斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应生成 和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。而班氏试剂中 的产生却是这样的：柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐，在水中它们均可水解产生 ，与柠檬酸钠 溶液和 溶液混合时， 结合，生成 与葡萄糖中的醛基反应生成砖红色沉淀。

 

（ 3 ）两种试剂的保存方式不同。斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈产生 ， 很容易沉淀析出，因此斐林试剂一般为现用现配；而班氏试剂的配方中，柠檬酸钠 为一对缓冲物质，产生的 数量有限，与 溶液混合后产生的浓度相对较低，不易析出，因此该试剂可长期保存。

 

当然，无论用班氏试剂还是斐林试剂，归根结底都是 与醛基在沸水浴加热条件下反应而生成砖红色的 沉淀，两者反应现象一样，这就是二者的相同之处。

<center> <p>  </p> </center>

上一篇：斐林试剂、双缩脲试剂和班氏试剂   下一篇：班氏试剂的配制与鉴定结果