流式细胞仪检测细胞凋亡方法(Annexin V 法)
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实验原理
实验试剂
1. PBS缓冲液：含0.1%NaN3 ，过滤后2-8°C保存。
2. Annexin V Binding Buffer缓冲液(Cat. No. 66121E)：浓度为10×，使用时，用稀释为1×浓度的应用液。
Annexin V-Biotin(Cat. No. 65872X) PI(Cat. No. 66211E)或
Streptavidin-FITC(Cat. No. 13024D) 7-AAD(Cat. No. 34321X)
Annexin V-FITC(Cat. No. 65874X) PI(Cat. No. 66211E)
Annexin V-PE(Cat. No. 65875X) 7-AAD(Cat. No. 34321X)
实验设备
Biotin SAv-FITC Annexin V-Biotin和SAv-FITC PI和SAv-FITC
实验步骤
1. 取Falcon试管，按标本顺序编好阴性对照管和标本管号。
2. 使用冷的PBS缓冲液洗细胞两次，再用1× Binding Buffer缓冲液制成1×106 细胞/ml的悬液。
5. 轻轻混匀，室温(20°C ~25°C)避光处放置15分钟。
6. *使用Annexin V-Biotin试剂进行检测时：
1×Binding Buffer缓冲液100μl溶解SAv-FITC试剂0.5μg，加入到细胞管中。
加入5μl PI，室温(20-25°C)避光处放置15分钟。
