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间接胶乳凝集试验

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2341

实验试剂

1.类风湿免疫诊断试剂盒:人变性IgG致敏的胶乳颗粒,阳性血清,阴性血清。

2.标本:被检血清56℃30分种灭活,可阻止假阳性凝集。

3.生理盐水。

实验设备

毛细管、刻度吸管、试管、牙签、黑色方格反应板、微量震荡器等

实验步骤

【操作方法】

1.先用生理盐水将被检血清、阳性血清、阴性血清做1:20稀释。

2.于黑色反应板上取三个方格,用毛细管分别加1:20被检血清、阳性、阴性血清各1滴。

3.于各方格内分别加胶乳试剂各一滴(每滴约0.05ml)。

4.立即旋转摇动玻板或用微量震荡器震荡,使两者充分混匀,3分钟内观察结果。

【结果观察】

1. 阳 性: 3分钟内出现明显而均匀的凝集颗粒、液体澄清者;

2. 阴 性: 3分钟内不凝集、仍保持均匀乳胶状者。

3. 定量测定:可将血清作倍比稀释,重复上法测定,以出现凝集的血清最高稀释度为RF的滴度。

【结果评价】

此法操作简单,结果清晰可见,容易判断,敏感性高与血凝试验,但特异性稍差。

【临床意义】

主要用于类风湿性关节炎的辅助诊断。此类病人RF阳性检出率达70%,但应注意,某些疾病如:全身性红斑狼疮、染性单核细胞增多症心内 膜炎、结核、梅毒、病毒感染、肾移植等,以及一些老年人可有类风湿因子水平增高的表现。

注意事项

1.每次实验均应设阳性与阴性对照。

2.稀释待测血清:因为血清中IgG浓度过高可抑制反应的发生,血清中白蛋白及其它蛋白亦有妨碍反应的作用,所以试验前需适当稀释待测血清。

3.胶乳试剂应保存在4℃,不得冰冻;用前要充分摇匀;反应以室温为宜。

4.血清和试剂的液滴要大小一致。

5.观察时应排除特异性凝集的可能,要与阳性、阴性比较。

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