毛细管气相色谱法测定阿奇霉素中的丙酮残留量

　　摘要： 目的 建立阿奇霉素中丙酮残留量的测定方法。方法 采用毛细管气相色谱法，氢火焰离子化检测器(FID)，以N，N二甲基甲酰胺(DMF)为溶剂，弹性石英毛细管柱DB624(30m×053mm，3μm)；柱温40℃维持10min，以40℃/min的速率升温至200℃，维持10min；载气：高纯氮气，线速度4ml/min；氢气：40ml/min；进样口温度250℃；检测口温度280℃；空气400ml/min；尾吹25ml/min；分流比2∶1；进样量1μl。结果 加样回收率为9984%，RSD为087%。结论 本法简便、灵敏、专属、准确，毒性小。

　　关键词： 毛细管气相色谱法； 阿奇霉素； 丙酮； 残留溶剂

　　阿奇霉素是新一代大环内酯类抗生素，在制备工艺中可能残留丙酮，中国药典2000年版规定阿奇霉素应做丙酮的残留量检查［1，2］。药典规定用苯做溶剂来测定，但苯属于ICH规定的一类溶剂，毒性大，致癌性大，应该避免使用。本文采用毛细管气相色谱法，氢火焰离子化检测器(FID)，以N，N二甲基甲酰胺(DMF)为溶剂，弹性石英毛细管柱DB624(30m×053mm，3μm)做丙酮的残留量检查的方法学考察，结果表明，该法简便、灵敏、专属、准确，毒性小，完全可以代替2000年版中国药典测定阿奇霉素中的丙酮残留量的方法。

　　1 仪器与试药

　　6890N气相色谱仪(安捷伦公司)配氢火焰离子化检测器(FID)；阿奇霉素原料药(批号040229，040333，040415)由宁波亚太药业有限公司提供；丙酮、DMF等有机溶剂均为分析纯。

　　2 色谱条件

　　色谱柱为弹性石英毛细管柱DB624(30m×053mm，3μm)；柱温40℃维持10min，以40℃/min的速率升温至200℃，维持10min；载气为高纯氮气，线速度4ml/min；氢气40ml/min；进样口温度250℃；检测口温度280℃；空气400ml/min；尾吹25ml/min；分流比2∶1；进样量：1μl。

　　3 方法与结果

　　3.1 溶液的配制标准储备溶液 精密称取丙酮02g，于100ml容量瓶中，用DMF定容。标准溶液 取标准储备溶液0、10、20、30、40和50ml于200ml容量瓶中用DMF定容。样品溶液 准确称取样品0400g于10ml容量瓶中，用DMF溶解并定容。

　　3.2 标准曲线的制备及结果取上述系列标准溶液进样，以测得丙酮峰的峰面积对丙酮浓度作回归，得到的回归方程为y=44241x+15818 r=09993

　　3.3 检出限在上述色谱条件下，测得的丙酮最低检出限为2μg(S/N=3)。

　　3.4 精密度与回收率对该方法的精密度和回收率测试进测试，加样回收率为9984%，RSD为087%(n=6)。

　　3.5 样品测定测定结果见表1。

　　4 讨论

　　为保证样品中残留丙酮完全释放，必须选择合适的溶剂完全溶解待测样品［3］。阿奇霉素在水中几乎不溶，在甲醇、无水乙醇、稀盐酸中易溶。本实验曾尝试用顶空法，80℃恒温45min，以水为溶剂来测定样品中的 表1 样品测定结果(n=6) 批号 测定结果 丙酮残留量，结果测得值明显偏低，说明样品在热水中的溶解度也是极小的，无法用水做溶剂来测定。药典规定的溶剂为苯，苯为致癌的有机溶剂，应尽量避免使用；用甲醇或无水乙醇作为溶剂，出峰时间比待测丙酮早且与丙酮峰距离太近，会干扰丙酮的检出，不予考虑；使用稀盐酸会影响毛细管柱的使用寿命，也不采用。根据ICH关于药品中溶剂残留量的指导原则［4］及文献［5］，本文选择DMF为溶剂，结果令人满意。该实验也适用于所有不溶于水而溶于DMF的抗生素原料药中残留丙酮的检查，前提是原料药在精制过程中曾用过丙酮作为提取溶剂。

　　参考文献

　　［1］ 国家药典委员会. 中华人民共和国药典(二部)［S］. 2000：336

　　［2］ 国家药典委员会. 中华人民共和国药典(二部附录)［S］. 2000：64

　　［3］ 任霞，徐小平，廖丽云，等. 毛细管气相色谱法测定头孢噻利和普卢利沙星中7种有机溶剂残留量［J］. 中国抗生素杂志，2004，29(6)：354

　　［4］ 李眉，马玉楠. 简介ICH关于药品中溶剂残留量的指导原则［J］. 药学进展，1998，22(3)：119

　　［5］ 姚倩，李章万，张强，等. 大口径毛细管气相色谱法检查药物中残留溶剂的方法研究［J］. 色谱，2001，19(2)：141