血型血清学检查――IgG 抗 A （抗B） 测定

IgG抗A（抗B）测定

（一）原理

血清以巯基乙醇（2－erptethn，简称2－e）处理后，IgM抗体分子裂解为6～7S亚单位。此种亚单位虽然仍保持与抗原结合的能力，但已失去其与相应红细胞凝集的作用。IgG抗体分子则不被2－e灭活，保持与相应红细胞致敏的血清学特性。IgA抗体分子可部分被灭活（7S单体不受影响，9S及11S多聚体被灭活）。

（二）试剂和材料

1．0．2／L2－巯基乙醇应用液取巯基乙醇1．6，以pH7．4的PBS（KH2PO41．73g，N2HPO4?12H2O19．35g，NC8g，加蒸馏水至100）稀释到100，分装安瓿，每支1或2，保存于冰箱备用。

2．受者血清

3．5％A型和B型红细胞PBS（或NS）悬液

4．抗人球蛋白血清

（三）操作

1．吸取受者血清0．4，加2－e应用液0．4，混合，将试管口塞紧，置37℃水浴中2小时。

2．排列小试管两排，每排10支，第1排每管各加pH7．4PBS0．4。

3．第1排第1管加2－e处理血清0．4，混合，吸出0．6，移0．2至第2排第1管内，其余0．4移入第1排第2管内，混合。以此类推，作倍量稀释至第10管，每管内留有1∶2，1∶4??1∶1024不同稀释度血清各0．2。

4．第1排每管各加5％A型红细胞悬液0．2，第2排每管各加5％B型红细胞悬液0．2，置37℃水浴温育1小时。

5．结果观察，如在前几管内发现有红细胞凝集者，是由于高效价IgG抗A（B）或IgA抗A（B）所引起，称为“盐水效价”。

6．其余红细胞未见凝集的试管，再以pH7．4PBS洗涤3次，除去洗涤液，留取压积红细胞。

7．每管各加pH7．4PBS2滴，混合。

8．每管各取1滴，分别移至另一排小试管中，再各加最适稀释度抗球蛋白血清1滴，混合。

9．1000r／in离心1in。轻轻摇动试管，观察结果，红细胞凝集的最高稀释度的倒数即为IgG抗A或抗B效价。

（四）注意事项

1．本法常用于ABO血型IgG抗A或抗B效价的测定，如ABO新生儿溶血病母亲血清中IgG抗A（B）的测定。

2．二硫苏糖醇（ithithreit，DTT）也可用于灭活IgM抗体，以测定IgG抗体。方法：0．01／LDTT（0．77gDTT溶于500等渗盐水）与等量受者血清混合，置37℃水浴30nin，再以此处理血清进行试。