玻片法凝固酶阳性葡萄球菌的再鉴定

为进一步弄清玻片法对葡萄球菌血浆凝固酶试验鉴定的准确性，我们收集了玻片法结果阳性的葡萄球菌118株，按Kloos等［1］分类方法进行详细鉴定与分类，结果报告如下。

　　1　材料与方法

　　1.1　菌株来源　菌株分离于1996年8月～1997年12月我院住院及门诊患者各类标本中，计118株。标准菌株ATCC 25923由天坛生物制品检定所提供。

　　1.2　菌种鉴定方法　将经玻片法凝固酶试验鉴定的、经纯化培养后保存于琼脂斜面的“金葡菌”118株，传代培养，按照Kloos等［1］方法再鉴定。

 

　　2　结果

　　2.1　菌种鉴定结果　金黄色葡萄球菌23株，中间型葡萄球菌28株，表皮葡萄球菌19株，溶血葡萄球菌15株，里昂葡萄球菌9株，人葡萄球菌7株，耳葡萄球菌7株，华纳葡萄球菌3株，其余是腐生葡萄球菌和柯氏葡萄球菌7株，共10种。

 

　　2.2　玻片法凝固酶重复试验结果　在限时操作的10秒种内，呈阳性反应者，23株金黄色葡萄球菌中有22株，28株中间型葡萄球菌中有25株，阳性反应准确率为92.16%(47／51)。

 

 

　　2.3　菌种与样品来源关系的观察，见表1。

 

表1　不同临床标本葡萄球菌的分离情况
 

 

 

　　2.4　β-内酰胺酶测试结果　采用酸测定法。同时用大肠埃希菌ATCC 35218及金黄色葡萄球菌ATCC 25923为质控菌株。118株葡萄球菌中，产酶株有61株，占51.69%。在产酶株中，以中间型葡萄球菌产酶率最高，占85.71%(24／28）。

　　2.5　抗生素敏感试验结果　10种葡萄球菌对12种抗生素耐药性相差不大，除对万古霉素、丁胺卡那霉素以及加酶抑制剂的抗生素敏感外，对其余抗生素敏感性均较低。

　　3　讨论

　　为防止玻片法检测血浆凝固酶试验假阳性反应，必须严格按《全国临床检验操作规程》［2］进行操作，即在10秒内||完成此试验。本室以前将此实验延时1～2分钟观察，致使假阳性率高达56.78%(67／118）。同时，为防止假阳性反应，还必须做试管法血浆凝固酶试验，以免“游离”的凝固酶漏检。

 

 

　　凝固酶阳性的葡萄球菌可分为金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌和家畜葡萄球菌。因此凝固酶试验阳性者不能定为金黄色葡萄球菌，必须再进行有关生化试验如耐热DNA酶、β-半乳糖苷酶，方可正确鉴定。

 

 

　　参考文献

　　1　Kloos W E,Lambe D W.Staphylococcus.In:Albert B.ed,Manual of Clinical microbiol.5 th ed.Washington:American society for microbol,1991.222

　　2　叶应妩，王毓三主编.全国临床检验操作规程.第二版.南京：东南大学出版社，1997.553～569