葡萄球菌的血浆凝固酶试验
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血浆凝固酶试验是葡萄球菌属鉴定中的关键试验,但其准确性始终未能很好解决。
目前公认用兔血浆较好,但许多实验室用病人血浆或血库血浆来代替,在一定程度上影响了结果的准确性。
病人血浆中含有各种抗体、药物;某些病人血浆中纤维蛋白含量低下;各种不同抗凝剂的影响;血浆被污染;如操作不当有感染疾病的危险。
试管法凝固酶试验检测葡萄球菌凝固酶,玻片法检测凝聚因子。有10%一15%金黄色葡萄球菌呈假阴性,因此必须用试管法验证凝聚因子试验。
玻片法检测凝聚因子试验操作过程中的注意点: 10s内观察结果。 必须制备浓厚的均匀菌悬液。 加血浆后不要再混搅,以免细菌凝块分散变小。 生长在高盐培养基上的菌落可出现自凝或假阳性。
介绍一种兔血浆制备方法:市售健康食用兔以无菌操作抽血,每毫升血液用EDTA·K2·2H2O2mg抗凝,3000r/min,10min离心分离血浆,分装于无菌小试管,每管血浆0.1ml+0.9%生理盐水0.4ml,混匀加塞盖,贮藏于2℃-8℃(45天后失效);-20℃和-85℃(第6个月结果不变)。一只兔可制备300份,使用时无需稀释,直接应用,方便简单。