抗核抗体与间接免疫荧光技术

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    在自身免疫性疾病中，人体组织细胞细胞核的核膜、核内的染色质、非组蛋白，以及核糖核酸（RNA）和相关的蛋白质等都可成为自身免疫反应攻击的靶子，产生抗核抗体（ANA）。其中有不少抗体因对疾病的诊断有高度的特异性，已成为诊断某一类疾病的血清标志性抗体，如抗双链DNA抗体、抗Sm抗体之于SLE，抗SSB抗体之于SS，抗Jo-1抗体之于多发性肌炎/皮肌炎等等。

 

 

　　间接免疫荧光法是检测自身抗体的标准技术。其特点是特异性强，通过荧光显微镜镜检能够精确地判断组织或细胞内荧光素的有无或分布，阳性与阴性样品的信号强度对比明显。自身抗原的位置决定了其相应抗体的典型的荧光模型，与此典型模型不相关区域的荧光均为非特异性荧光。另外基质制备容易，不需要复杂的技术就可生产出冰冻组织、细胞和细菌涂片,也不需要纯化抗原，由于保留了原基质的完整抗原谱，因而一块基质片可同时筛查多种不同的自身抗体，获得较高的检测效率。也可以在一个反应区上组合多种基质，类似于马赛克，由于检测项目的温育时间是一致的，易于标准化，特别适合于检测自身抗体谱，如肝病抗体谱等。在某些情况下，用间接免疫荧光法还可检测到一些未知抗原的抗体。

 

　　通过荧光模型的分析可初步区分阳性标本。如果需要，再继续进行单特异性分析，来确定自身抗体的靶抗原。抗体的最终区分需要使用带有纯化抗原基质的方法，如酶联免疫吸附测定法或斑点印迹法（检测ENA）。但两种方法结合应用所检测到的疾病种类仍是有限的，由于并不是所有的相关纯化抗原都能得到，特别是如果抗原不纯还会产生假阳性的结果，而且到目前为止并不是所有的相关抗原抗体系统都已被发现，所以对自身免疫性疾病的发病机制还在不断的研究中。