全自动生化分析仪中的试剂交叉污染

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李小燕 (合肥市第八人民医院检验科)

 

 

全自动生化分析仪中的交叉污染分为样品交叉污染和试剂交叉污染两类。
样品交叉污染主要来自样品针的携带污染，在大多数全自动生化分析仪的设计中对此均通过样品针的内外冲洗技术来解决。
而试剂交叉污染则是近年来引起检验人员关注的话题，因为试剂交叉污染的避免必须依赖于检验人员的正确操作。
一、仪器自身交叉污染的消除
交叉污染在全自动生化分析仪上出现的环节较多，但主要集中在样品加样针、试剂加样针、搅拌棒、比色杯等部件。
由于为了保证加样精度，一般生化分析仪的加样针，都会在加样的时候略过量吸取样品或试剂，然后进行加样。以至于加样后加样针的内壁会残留一些样品或试剂。仪器会自动排空、加压内外冲洗。许多产品还提供样品加样针的专用清洗程序。
搅拌棒也会出现交叉污染，当搅拌棒加入比色杯时，很容易把上一次搅拌的残留物带入比色杯，这样会造成比色结果不准确。可以在每次搅拌后注意观察搅拌棒是否完全清洗干净，清洗的水是否充分清洗搅拌棒的最上沿。如果没有可以调整搅拌棒的清洗高度。在每次试验完成以后用酒精或次氯酸清洗搅拌棒，达到理想状况。涂有特富龙的搅拌棒有助于改善清洗效果。
为了防止比色杯出现交叉污染，可以在每批测试结束后清洗比色杯。在每天全自动生化仪关闭之前，也应该在杯子中储满水，等第二天开机时再清洗比色杯。可以调整比色杯清洗水量使其到达比色杯的三分之二的高度，也可以把比色杯拿出用95%的酒精清洗或进行超声清洗。
二、一次试剂交叉污染的实例
由于任何自动清洗系统都有不同程度的残留，因此以下情形都有可能出现试剂交叉污染：
－ 试剂中含有下一测试所要测定的底物；
－ 试剂中某种成分与下一反应所要测定的底物有作用；
－ 当前反应物对后一反应有影响。
往往这些情形出现时，检验人员并没有去从试剂交叉污染的角度考虑。
我科出现过一次胆固醇对总胆汁酸的交叉污染问题。当时做总胆汁酸时，由于总胆汁酸受外界影响挺大，我们把总胆汁酸放在最前做。当时胆固醇与总胆汁酸相隔很多项目，在测试结果中开始总胆汁酸的值挺正常，到后来测试结果成倍的高。在清洗比色杯和加样针后，单独重复做总胆汁酸结果都很高。其后，单独做总胆汁酸，发现总胆汁酸数值呈正态分布，值从低到高再从高到低。考虑可能存在交叉污染现象。又采取了清洗试剂加样针后跟随做样本，随着试剂加样针清洗的次数由少到多，样本的测定值也随之下降到连续得到稳定值。在这中间又对试剂加样针的内壁清洗压力进行了相应的提高。在这次事件后通过查资料发现试剂加样针R1在加胆固醇、甘油三酯试剂R1中含有胆酸钠，造成TBA测定结果明显增高。胆固醇、载脂蛋白A、HBDH后针内含有高浓度的磷酸盐缓冲液，使磷测定结果不同程度偏高。肌酸激酶、CK-MB试剂R1含有镁，对镁测定有影响。为了消除试剂间的交叉污染，我科在排序上把项目设置成：
1.CHO 2.ALT 3.AST 4.ALP 5.GGT 6.TP 7.ALB 8.BUN
9.UA 10.CR 11.CK 12.CK-MB 13.LDH 14.GLU 15.P 16.TG 17.HDL
18.LDL 19.APOA 20.APOB 21.TBA 22.TBIL 23.DBIL 24.MG。