全自动生化分析仪使用中项目间交叉污染的探讨
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在运用全自动生化仪检测标本时,有时会遇到一些项目,如磷,镁的结果特别高,再复查结果就正常现象。或者碰到标本外观正常而三酰甘油结果异常升高。就这个试剂之间污染问题,我们进行了实验观察,并将如何避免这种现象进行探讨。
一、材料
1.仪器 HITACHI 7150全自动生化仪。
2.试剂 Wako、BM、Centronic和复星长征公司产品。
3.标本 混合血清,以20名健康检查者血清混合而成。
二、方法
选择某些项目的试剂列为实验对象。其中,含磷酸盐缓冲液试剂的项目,如尿酸、胆固醇、乳酸脱氢酶等是作无机磷检测的疑似产生交叉污染项目;含镁离子试剂的三酰甘油、肌酸激酶等项目是镁检测的疑似交叉污染项目;含甘油的一些项目是三酰甘油检测的疑似交叉污染项目。
实验时,3个项目分开观察,以4种方式实验。结果表中的第一种结果是让观察的项目单独先做1次混合血清检测;第二种结果是让被观察项目的疑似产生交叉项目先对血清测1次,接着立即作观察项目的测定;第三种结果在第二种方式作观察项目测定前,加做1次对观察项目无影响的其它项目测定;第四种结果是在第二种方式下,作观察项目测定前,加做2次对观察项目无影响的其他项目测定。
三、结果
磷、镁、三酰甘油交叉污染实验数据见表1:
四、讨论:
由于许多项目如尿酸,胆固醇,乳酸脱氢酶等试剂中含磷酸盐缓冲液,卫生部临床检验中心推荐葡萄糖氧化酶法的试剂中也含0.1mol/L磷酸盐缓冲液;镁离子是三酰甘油、肌酸激酶试剂中不可缺少的成份,甘油又是一种酶保护剂。使用前应认真阅读说明书,避免项目组合时,因试剂成份对检验结果产生交叉污染。实验结果显示,在没有污染的情况下,第一种方式测定结果列为观察依据,第二种方式明显升高,三酰甘油增高达5倍,无机磷达到2倍多。说明仅靠仪器内蒸馏水一次冲洗不能解决次检测试剂残余对下次检测的污染。第三种方式是中间隔一个非污染项目,结果表明还存在明显影响。本实验说明使用全自动生化仪随机组合检测项目时,某些项目不能随心所欲、必须注意位置的特别设置。
目前除了一些高档的全自动生化仪为防止污染,采用洗涤加脱气装置或加超声洗涤装置外,一般随机组合式全自动生化仪可以通过增加洗涤的次数或改变吸取试剂的方式来消除这类污染。所以由厂家提供给客户使用的仪器参数,项目的位置是经过反复论证,是最佳状态,建议不要随意改动。否则容易造成测定结果不可靠。
在实验过程中还发现,碱性条件下反应项目如肌酐苦味酸速率法,果糖胺动力法受酸性试剂的影响反应速率减慢。同样观察到尿酸试剂受到强酸性试剂影响结果明显偏低现象。说明这类污染还有多种表现,受影响的项目不少。根据我们经验,只要合理安排项目位置,就可有效避免这种现象。原则是将具相同反应原理放在一起,相同酸碱度反应放在一起;试剂内含有被测成份的和该项目相隔两个项目位置以上;易污染项目测定前吸样针设置清洗2次以上等。这些供同道参考指教。
因此要想获得正确可靠结果,不但需要熟练掌握仪器操作,更需要了解反应原理,试剂组成等方面知识。