糖原染色标准操作规程
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1. 实验原理
过碘酸是氧化剂,使含有乙二醇基(-CHOH—CHOH)的多糖类物质(糖原粘多糖、粘蛋白、糖蛋白及糖脂等)氧化,形成双醛基(—CHO—CHO)。醛基与雪夫试剂中的无色品红结合,使无色的品红变成紫红色化合物,定位于含有多糖类的细胞内。
2. 标本采集
2.1 病人准备:了解病人是否对局麻药有过敏史。凝血因子严重缺陷引起的出血性疾病,穿刺部位有炎症或有畸形,晚期妊娠妇女作骨髓穿刺时要慎重。
2.2 标本种类:新鲜抽取的骨髓穿刺液
2.3 标本采集要求
2.3.1 高压消毒的穿刺针,一次性无菌手套和抽取骨髓液的无菌注射器。
2.3.2 临床上首选穿刺部位为髂后上棘;翻身困难,需多部位穿刺患者可选择髂前上棘为穿刺部位。小于3岁的小儿还可选择胫骨头内侧为穿刺部位。
3. 标本储存:滴加固定液盖满血膜5分钟,水洗待干室温避光保存。
4. 标本运输:室温运输
5. 标本拒收的标准:溶血、稀释标本不能作测定
6. 试剂
6.1 试剂名称:血细胞PAS染色测定
6.2 试剂生产厂家:上海太阳生物技术公司
6.3 试剂组成
试剂1:PAS固定液,10%甲醛甲醇溶液。2℃-8℃避光保存,有效期六个月。
试剂2:PASⅠ液,10g/L(1%)过碘酸溶液。2℃-8℃避光保存,有效期六个月。
试剂3:PASⅡ液,又称Schiff氏液。2℃-8℃避光保存,有效期六个月。
试剂4:苏木素复染液。2℃-8℃避光保存,有效期六个月。