生化分析仪双试剂R1、R2消耗量不对等的解决办法

互联网2014-12-26

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在<a target="_blank">生化</a>室日常工作中，大家会发现：在双试剂测试项目中，总是R2用完了，而R1尚余很多，随着检验次数的累积，这种效应越加明显，留下来的R1留之无用，弃之可惜。

生化试剂R1、R2消耗量不对等的原因：

如果查阅仪器说明书，可以发现生化试剂在使用过程中是有损耗的，这种效应是由于仪器本身设计有试剂 ”取样/ 富余量“所致，多数仪器都存在这种问题。

仪器在试剂瓶转移到反应杯的过程中，会多吸入大概5ul的量，R1、R2同样的加试剂办法，到最后会出现什么情况呢？以ALT试剂为例，规格R1为200ml，R2为50ml，正常情况下仪器参数设为：样品20ul； R1为160ul，R2为40ul，实际吸试剂时，R2每次吸的量是45ul，这样R2将在1111次测试后用完，而R1在111undefined（160+5）次测试后，用量为183ml，富余量为17ml，相同批号试剂累积到5盒时，R1的富余量将是85ml。

解决思路：

在双试剂测试中，R1 一般为缓冲液， R2为反应物质混合物。设想：两试剂按二种不同比例混合，其所含反应物成分、构成比不变，只是反应物浓度不同，而反应物浓度不同对测定中的反应实质没有影响，只对反应的有效检测线性范围有影响；在样品量不变的情况下，如果适当增加反应物浓度，其线性范围变宽，浓度减低，则线性范围变窄；而如果同时将样品量也减少一些，则仅是曲线的斜率略降低（灵敏度略降低），而线性范围几乎不受影响；对于酶类速率法测定来说，在没有校准品时，所提供的K 值有意义，不能轻易改动，而在有校准品时，K 值是可以调整的。

解决办法：

如果处于节约试剂的考虑，如上例ALT项目可采取：R1 设定量不变，R2 新设定量为为36ul。样品新设定量= 原设定量（20ul）（36/40） = 18ul，用校准品重新定标。

结果：

R2采用新设定量36ul，总的测试数变为1219次，比原先1111次增加了119次，增加了10%的测试数，即实现了节省试剂成本10%；理论上，牺牲了很小的检测灵敏度，实际应用中，室间质评和室内质控都没有影响。