【原创】RNA提取的流毒非浅的经典误区（初学者的必看贴）
丁香园
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RNA提取的流毒非浅的经典误区（初学者的必看贴）
最近碰到了好几个RNA提取的初学者来实验室学习如何提取RNA，对于如此简单的操作，却有如此多的人提取不出来，细问一下，原来他们的知识来源都是书本上或者网上的“RNA提取注意事项一类”的所谓经验，其实，他们提取不出来的真正原因，恰恰是他们严格遵守了所谓的经验，精力全放在不需要注意的地方，结果搞得自己很紧张， 真正需要注意的操作反而没有注意了。下面我就结合生物通上常见的RNA 操作注意事项与实验技巧的文章
（http://www.ebiotrade.com/newsf/2004-3/B2004312163158.htm）指出提取RNA的流毒非浅的常见误区：
1．“ 如果可能，实验室应辟出专门RNA操作区，离心机、移液枪、试剂等均应专用。RNA操作区应保持清洁，并定期进行消毒。”
完全错误，任何普通的试验台，不需要任何消毒，暴露在空气中就可以。用我的话说就是垃圾堆里面我都可以提取出RNA!有的学生告诉我他们在哪里提取的， 他们在超净台里面操作，只有两个孔伸手进去，操作及其不便，还容易使人疲劳，风干RNA沉淀的时候，也看不清楚，常常造成要么干过头，要么乙醇残留高。
2．“操作过程中应自始至终佩戴抛弃式橡胶或乳胶手套，并经常更换，以避免将手、臂上的细菌和真菌以及人体自身分泌的RNA酶带入试管或污染用具。尽量避免使用抛弃式塑料手套。塑料手套不贴身，常常造成操作不便，而且多出部分还容易在器具上遭RNA酶污染并向未污染处传递，扩大污染。
这是流传最广的错误，因为手上的RNA酶，按照正常的操作，怎么可能带到离心管里面？即使沾到外面了，对里面的RNA酶也完全没有影响啊。除非有人参观，我一般提取RNA根本不注意是否带了手套，戴手套也是为了保护手不沾到苯酚， 而不是怕污染。至于扩大污染一说， 完全是胡扯，试验台上到处是飞沫，手接触后留下的RNA酶，早就污染完全了，再说，它们怎么可能转到小离心管里面？
3．研钵去干烤。
不需要，洗干净，晾干就可以了，即使里面有一些RNA酶残留，有液氮的时候如此低的温度下怎么可能降解RNA，转到裂解液后，外源，内源的RNA酶就会被全部抑制。何况，组织里面那么多的RNA酶研磨的时候都不会降解RNA，残留一点在研钵上的RNA酶就会吗？
4．操作时候戴口罩，帽子，不说话。
不需要， 除非你提取的时候唾沫横飞， 而且特别准确，有一滴飞入了你手上拿的1.5毫升的离心管。总之，我边提取的时候， 边要和学生大谈，提取RNA如何如何的简单。
5．用DEPC处理枪头， 小离心管。
不需要，国外的枪头，离心管散装的，装好在枪头盒里面 ，直接可以用，不需要高压灭菌。国产的我用得不多， 反正我买过浙江产的2分钱一个的离心管，照样不需要DEPC处理，不需要高压，打开了，直接用。总之做不出来， 首先千万不要找枪头，离心管是国产质量不好的原因。当然如果管子里面有残留RNA酶，保存时间不可能很长，建议大家提取后，立刻使用如转膜，或者逆转录，不要存放时间太久。
大家想一下， 当大家经过了网上如此繁琐的错误的注意事项洗礼的时候，他还能有精力去注意提取RNA的重点和真正应该注意的东西在什么地方吗？
其实，真正应该注意的就是。。。。。。，我累了，下次说。
最近碰到了好几个RNA提取的初学者来实验室学习如何提取RNA，对于如此简单的操作，却有如此多的人提取不出来，细问一下，原来他们的知识来源都是书本上或者网上的“RNA提取注意事项一类”的所谓经验，其实，他们提取不出来的真正原因，恰恰是他们严格遵守了所谓的经验，精力全放在不需要注意的地方，结果搞得自己很紧张， 真正需要注意的操作反而没有注意了。下面我就结合生物通上常见的RNA 操作注意事项与实验技巧的文章
（http://www.ebiotrade.com/newsf/2004-3/B2004312163158.htm）指出提取RNA的流毒非浅的常见误区：
1．“ 如果可能，实验室应辟出专门RNA操作区，离心机、移液枪、试剂等均应专用。RNA操作区应保持清洁，并定期进行消毒。”
完全错误，任何普通的试验台，不需要任何消毒，暴露在空气中就可以。用我的话说就是垃圾堆里面我都可以提取出RNA!有的学生告诉我他们在哪里提取的， 他们在超净台里面操作，只有两个孔伸手进去，操作及其不便，还容易使人疲劳，风干RNA沉淀的时候，也看不清楚，常常造成要么干过头，要么乙醇残留高。
2．“操作过程中应自始至终佩戴抛弃式橡胶或乳胶手套，并经常更换，以避免将手、臂上的细菌和真菌以及人体自身分泌的RNA酶带入试管或污染用具。尽量避免使用抛弃式塑料手套。塑料手套不贴身，常常造成操作不便，而且多出部分还容易在器具上遭RNA酶污染并向未污染处传递，扩大污染。
这是流传最广的错误，因为手上的RNA酶，按照正常的操作，怎么可能带到离心管里面？即使沾到外面了，对里面的RNA酶也完全没有影响啊。除非有人参观，我一般提取RNA根本不注意是否带了手套，戴手套也是为了保护手不沾到苯酚， 而不是怕污染。至于扩大污染一说， 完全是胡扯，试验台上到处是飞沫，手接触后留下的RNA酶，早就污染完全了，再说，它们怎么可能转到小离心管里面？
3．研钵去干烤。
不需要，洗干净，晾干就可以了，即使里面有一些RNA酶残留，有液氮的时候如此低的温度下怎么可能降解RNA，转到裂解液后，外源，内源的RNA酶就会被全部抑制。何况，组织里面那么多的RNA酶研磨的时候都不会降解RNA，残留一点在研钵上的RNA酶就会吗？
4．操作时候戴口罩，帽子，不说话。
不需要， 除非你提取的时候唾沫横飞， 而且特别准确，有一滴飞入了你手上拿的1.5毫升的离心管。总之，我边提取的时候， 边要和学生大谈，提取RNA如何如何的简单。
5．用DEPC处理枪头， 小离心管。
不需要，国外的枪头，离心管散装的，装好在枪头盒里面 ，直接可以用，不需要高压灭菌。国产的我用得不多， 反正我买过浙江产的2分钱一个的离心管，照样不需要DEPC处理，不需要高压，打开了，直接用。总之做不出来， 首先千万不要找枪头，离心管是国产质量不好的原因。当然如果管子里面有残留RNA酶，保存时间不可能很长，建议大家提取后，立刻使用如转膜，或者逆转录，不要存放时间太久。
大家想一下， 当大家经过了网上如此繁琐的错误的注意事项洗礼的时候，他还能有精力去注意提取RNA的重点和真正应该注意的东西在什么地方吗？
其实，真正应该注意的就是。。。。。。，我累了，下次说。
