【建议】连接转化问题讨论专帖

近期发现连接转化的问题特别多,希望各位战友能把自己的问题和意见解答都交流出来,只要有建设性的不管问题还是解答,打分从宽,以促进各位战友共同进步,不至于在这些常规问题上浪费时间和精力.
同时也希望发问的战友尽量在后面跟帖而不是另开帖,也希望各位战友能把自己以前的有建设性的问题及解答粘贴过来,互相交流.
近期的链接如下(1.10-1.5.可以直接在链接下面讨论):
【求助】急救!关于重组质粒构建的问题.
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5197576&sty=1&tpg=1&age=0
【求助】又是连接,转化的问题,急死我了!
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5326375&sty=1&tpg=1&age=0
【求助】连接怪现象
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5255519&sty=1&tpg=1&age=0
【求助】 大家帮忙看看这种共用碱基和紧挨的酶切位点怎么切
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5325685&sty=1&tpg=1&age=0
【求助】今天跑了连接产物的电泳
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5322724&sty=1&tpg=1&age=0
【求助】平板上没有菌落生长！
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5309232&sty=1&tpg=2&age=0
【求助】连接转化后菌长满平板,却提不出连接后的质粒
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5323979&sty=1&tpg=2&age=0
【求助】看看我的转化过的细菌是怎么了
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=4807810&sty=1&tpg=3&age=0
【求助】转化质粒做不出，急
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5298400&sty=1&tpg=3&age=0
【求助】我设计的一个酶切位点Sal1，质粒转入DH5a中可以吗？DH5a有甲基化活性，是这样的吗？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5298995&sty=1&tpg=4&age=0
【求助】卡那的板是不是比氨苄的板长的慢？？
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5307169&sty=1&tpg=4&age=0
【求助】酶连提质粒后怎么没东西
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5292278&sty=1&tpg=5&age=0
【求助】关于质粒构建的问题
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5299465&sty=1&tpg=5&age=0
【求助】简单而恼人的连接
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5307817&sty=1&tpg=5&age=0
【求助】大片段的连接及BAC抽提问题
http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5234937&sty=1&tpg=6&age=0

http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=5309232&sty=1&tpg=2&age=0