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【求助】miRNA mimic用FAM标记后,转染细胞,荧光显微镜下观察

丁香园论坛

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转入细胞的可见FAM标记的绿荧光,不过本人有一点搞不懂,可能有一些是没有转进细胞的,为什么细胞外就看不到荧光呢?
能不能这样理解,进入细胞后就具有了聚集的作用,分散在培养基中就不明显了
你好,我想问一下你每次转染后多长时间观察,还有用的miRNA mimic的量是多少啊,我稀释到20mM,每次转2ul,也就是200pM,可是在倒置荧光显微镜下观察到的荧光很弱@batton。谢谢!
我的FAM转染之后,细胞外散在大片绿色亮点,部分细胞内也有绿色显色,但颜色比较淡。怎么回事。20倍视野也就转染10多个细胞,这转染效率也不高啊。
lvhen520 wrote:
我的FAM转染之后,细胞外散在大片绿色亮点,部分细胞内也有绿色显色,但颜色比较淡。怎么回事。20倍视野也就转染10多个细胞,这转染效率也不高啊。
FAM标记容易淬灭 ,推荐使用cy3,cy5标记的mimic,你方便留个联系方式吗?我有个荧光标记RNA oligo(即siRNA/miRNA mimic)使用说明的技术文档,给你发一下。
我一般转染48小时观察的@ouyi2738
aaron古 wrote:
FAM标记容易淬灭 ,推荐使用cy3,cy5标记的mimic,你方便留个联系方式吗?我有个荧光标记RNA oligo(即siRNA/miRNA mimic)使用说明的技术文档,给你发一下。

我的邮箱:lvchen136@sina.com,谢了啊。

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