【求助】切解答淋巴细胞中提取RNA的一些问题

我用人的外周血4ml分离淋巴细胞，计数约400万个细胞，分成两孔种到24孔板中，培养3天后提取淋巴细胞的RNA，由于红细胞较多，提RNA前用红细胞裂解液先处理了细胞的，操作严格按照说明书进行，我用的是Takala的Trizol，500ul，800ul，1ml的量都用过，但是每次做到加入异丙醇离心后均未见沉淀，用DEPC水溶解后跑电泳也没有条带，不知道是什么原因，RNA提不出来，实验没办法进行，着急啊，请大家帮我解答一下，万分感谢！

呜呜，怎么没有人解答下啊

建议检查使用红细胞裂解液处理后是否还剩下足够的完整的白细胞，有时白细胞也会被破坏。还有一种办法：不必去除红细胞，直接提取总RNA，以免造成白细胞及其RNA的损失。

好心人啊，终于看到有人回复了，嘿嘿。
我还想问下因为一直提不出来RNA我就尝试各种办法，上次是将淋巴细胞分离后用溶血素处理后再把细胞种在6孔板里，种了1undefined7个细胞，培养3天后提取RNA，用DEPC水溶解后跑电泳，跑出条带了，但是是上面和下面各一条清晰的条带，中间有一团像是很多条带一样不清晰的，按道理应该是提出RNA了的，因为看到了直径约1mm的白色膜状沉淀，说明还是可以提出RNA，但是另一个问题是我实验时因为干预因素较贵，不能用这么多细胞，只能用1undefined6个细胞800ul培养基在24孔板培养，所以不知道这么少的细胞提RNA能行不，有人跟我说这么少的细胞只用加10ul的Trizol，加多了会稀释，因为血标本来之不易，我没敢试，想问问这么少的Trizol可以吗，谢谢！

你现在做的怎么样了，我也是从血中分离淋巴细胞，培养后提RNA，现在前半部分做的很好了，就是提RNA这步还拿不准，能把你的具体方法发给我看看吗，看看离心时间，速度还有静置时间跟我的一样不，谢谢

我是按照Takala的提取说明书做的，不知道你是不是用的那个公司的