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【求助】点突变

丁香园论坛

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我同事从植物提取物中获得了一个小分子化合物,已经证实这个化合物可以跟A受体结合从而引起相应的效应。我同事现在想知道该化合物在A受体的结合位点。估计要用到点突变技术,请问哪个实验室或者公司有类似的外包业务。价格大概多少。除此之外还可以采用什么方法。

请各位专家不吝赐教!谢谢!
自己买引物和Pfu酶就可以做点突变了,很简单的,只需要最基本的分子克隆知识。
laforet wrote:
自己买引物和Pfu酶就可以做点突变了,很简单的,只需要最基本的分子克隆知识。

谢谢。因为本实验室以前没有做过类似的实验,不知道摸索的时间长不长。
想了一下需要的东西还是很多,你要先合成这个基因,然后用高保真聚合酶和含突变的引物扩增含突变的质粒,用DpnI消化模板然后转化细胞表达。

如果有原核表达经验的话上手没有困难,但是如果从头学起的话半年是需要的
laforet wrote:
想了一下需要的东西还是很多,你要先合成这个基因,然后用高保真聚合酶和含突变的引物扩增含突变的质粒,用DpnI消化模板然后转化细胞表达。

如果有原核表达经验的话上手没有困难,但是如果从头学起的话半年是需要的
谢谢!

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