【求助】我设的6个时间点(15min-2day)能否满足Akt、PTEN变化研究?
我要研究Akt、PTEN蛋白在接受处理因素后的变化情况。参考一些帖子和文章,看到:5min-120min用于研究受体传递放大信号;2h-48h用于研究细胞接受信号后出现细胞周期变化、出现特定生物行为等。
于是我设计了几个时间点:15min, 30min, 60min, 2h, 4h, 8h, 16h, 应该足够研究细胞接受处理后出现的短期长期变化情况了吧?
既然你查文献中是到48小时,为什么你设计的最长是到16小时?
我觉得,大家设计实验的根据是:细胞信号转导也就前个把小时,之后就是细胞接受了信号开始执行其生物功能了(增殖、凋亡、分泌……)。
在前2小时以内研究信号转导蛋白,之后研究转录因子、基因转录情况,然后是增殖凋亡等一系列变化。在发生后期的变化时,信号转导蛋白应该已经完成其功能了。
我觉得应该修改时间点:0,20,40,60,80,100,120,min 因为要测定上游的Akt、Pten等蛋白。
楼主你好,我现在也在做类似的内容,想要看Akt、PTEN蛋白在药物处理后的变化,觉得你考虑的很有道理,蛋白水平的变化要在药物处理早期就研究,不知道你的设想有没有被证实?这几个时间点是不是合适呢?我也是新手,希望能多多指教呢!方便的话加我qq可不可以?798734565,先谢~~~
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