【求助】关于克隆包含pri-miRNA的基因组片段到表达载体来表达miRNA的问题
丁香园论坛
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很多文章使用这种方法来表达miRNA, 而且我在论坛上看到很多坛友也比较推崇这个方法。但是我最近遇到了问题：我想要克隆表达的miRNA具有5p和3p两种剪切形式，理论上我把包含该pri-miRNA的基因组片段到表达载体在细胞里表达之后，这种情况下我表达出来的miRNA是兼有5p 3p两种形式？或者是只有一种呢？
很困惑，请大家不吝赐教！
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1. 查文献，看这个miRNA的5p和3p是否都有表达，还是以其中一个为主要产物
2. 如果想得到5p和3p其中一个，先扩完整的，再进行突变处理
2. 如果想得到5p和3p其中一个，先扩完整的，再进行突变处理
吴佰霖 wrote:
1. 查文献，看这个miRNA的5p和3p是否都有表达，还是以其中一个为主要产物
2. 如果想得到5p和3p其中一个，先扩完整的，再进行突变处理
1. 文献里的设计到5p和3p两种剪切体的好像都是用的miRNA mimics， 目前还没看到用这种方法的。
2. 这种方法我也想过，但是我预测的是只有3p能够Target到目的基因，5p无法Target，所以就无法确定该怎么突变处理。
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