【求助】关于β-catenin，请各位师兄师姐帮帮我!!

各位师兄师姐好！我是一名刚刚开始做实验不久的研究生，只知道做PCR。我的导师说他的课题想测β-catenin（WNT通路）在肝癌细胞中表达的量，要用流式细胞术测，交给我做。可是我没有接触过这类的东西，所以想请教一下师兄师姐，β-catenin这个蛋白是存在于细胞核内，还是在细胞质中，还是分泌到细胞外？ 另外我用流式细胞术应该怎么测试这个蛋白？

或者有没有哪位师兄师姐有这方面的资料，可以传给我的，感激不尽~~

拜托师兄师姐了！！

我的邮箱是huangzl0924@sina.com

楼主您好。

以前也做过β-catenin的一些研究，我个人觉得可以这样来分析：

1.β-catenin在细胞膜、胞浆以及胞核都可以存在表达，具体的功能也很多，如果你刚开始做实验的话建议你先看中文的关于β-catenin的文献，再看英文的，pubmed上可以直接搜到很多关于β-catenin和Wnt通路的综述，里面都讨论的很详细，这个是实验的前提；

2. 您导师说的用流式细胞仪检测β-catenin的表达是可以的，因为β-catenin有一部分是结合在细胞膜上的，可以通过抗体标记直接拿流式可以测到，这个只需要订购相关的抗体即可；因为我不知道你到底想研究β-catenin的什么功能？是介导粘附？传导？还是进入核内转录调控？每个研究方法都不一样；

3.我觉得你可以按这个思路来做，先提取总蛋白进行Western BLot，看总的β-catenin的改变；然后结合免疫荧光标记β-catenin ，看它在细胞内的分布和定位；然后就是分布提取细胞膜、细胞浆和细胞核的蛋白再进行Western Blot，验证β-catenin在各亚细胞器的定位和表达；下来就是可以再结合流式细胞术分析β-catenin的表达情况等。

个人意见和建议，请大家讨论，祝楼主好运。

楼上的前辈的发言很精辟 赞！